【摘 要】
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猪圆环病毒2型(PCV2)是一种能引起猪免疫抑制的病毒,导致猪对其它病原的易感性增加,产生比单一病原感染更严重的病变,严重危害养猪业的发展。研究表明PCV2的Cap蛋白能与宿主细胞蛋白gC1qR结合,介导机体的各种反应,而gC1qR是一种在进化上高度保守、在真核细胞中普遍存在且广泛分布的蛋白,PCV2 Cap与gC1qR结合,诱导机体的免疫细胞高表达白细胞介素10,进而干扰机体的抗病毒免疫反应。但
【基金项目】
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国家自然科学基金(NO.31672535); 陕西省重点产业创新链项目(NO.2018ZDCXL-NY-02-07); 西北农林科技大学青年英才资助项目(2452017023);
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猪圆环病毒2型(PCV2)是一种能引起猪免疫抑制的病毒,导致猪对其它病原的易感性增加,产生比单一病原感染更严重的病变,严重危害养猪业的发展。研究表明PCV2的Cap蛋白能与宿主细胞蛋白gC1qR结合,介导机体的各种反应,而gC1qR是一种在进化上高度保守、在真核细胞中普遍存在且广泛分布的蛋白,PCV2 Cap与gC1qR结合,诱导机体的免疫细胞高表达白细胞介素10,进而干扰机体的抗病毒免疫反应。但是,gC1qR在PCV2诱导机体免疫反应中的作用及机制还有待系统深入地研究。本研究以PCV2灭活疫苗作为对照,首先比较缺失gC1qR结合活性的PCV2突变毒株与野生型PCV2毒株在感染28 d内仔猪体温、体重、PCV2 Cap特异性抗体水平、中和抗体水平、淋巴细胞增殖水平、外周血病毒载量和病理组织学的差异,确定gC1qR在PCV2诱导机体免疫反应中的作用。在此基础上,以低剂量野生型PCV2毒株和突变型PCV2毒株作为疫苗免疫仔猪,在免疫后的14 d或28 d给予高剂量PCV2野毒感染,比较在感染后的28 d内,仔猪体温、体重、PCV2 Cap特异性抗体水平、中和抗体水平、淋巴细胞增殖水平、外周血病毒载量和病理组织学的差异,探究仔猪免疫PCV2突变毒株后对机体感染高剂量野生型PCV2是否具有免疫保护作用。本研究获得以下结果:1.以野生型PCV2和突变型PCV2感染仔猪后28 d内,比较仔猪体温、体重、PCV2Cap特异性抗体水平、中和抗体水平、淋巴细胞增殖水平、外周血病毒载量和病理组织学的差异。结果表明,与野生型PCV2相比,缺失gC1qR结合活性的PCV2突变毒株能够诱导机体产生更强的PCV2 Cap特异性抗体和中和抗体,更强的淋巴细胞增殖活性,且缺失gC1qR结合活性的PCV2在体内的复制能力显著下降,并不引起肺脏和淋巴组织病变。2.以PCV2灭活疫苗、突变型PCV2和低滴度野生型PCV2,免疫仔猪14 d后,用高滴度的野生型PCV2感染,比较仔猪从攻毒后28 d内体温、体重、PCV2 Cap特异性抗体水平、中和抗体水平、淋巴细胞增殖水平、外周血病毒载量和病理组织学的差异。结果表明,免疫PCV2灭活疫苗和PCV2突变毒株的仔猪在免疫的前期被高剂量野生型PCV2感染,感染仔猪的体温体重不会发生显著的变化,而低剂量野生型PCV2免疫后的仔猪在高剂量野生型PCV2感染后,体温升高,体重增长缓慢;免疫PCV2灭活疫苗和PCV2突变毒株的仔猪在高剂量野生型PCV2感染后,机体产生大量的PCV2特异性抗体和中和抗体,淋巴细胞增殖能力增强,而低剂量野生型PCV2免疫后的仔猪在高剂量野生型PCV2感染后,机体产生PCV2特异性抗体和中和抗体的能力被抑制,淋巴细胞增殖能力较弱;免疫PCV2灭活疫苗和PCV2突变毒株的仔猪在高剂量野生型PCV2感染后,仔猪肺脏和淋巴结不产生显著的病理变化,而低剂量野生型PCV2免疫后的仔猪在高剂量野生型PCV2感染后,仔猪肺脏和淋巴结产生严重的病理变化。3.以PCV2灭活疫苗和突变型PCV2野生型PCV2,免疫仔猪28 d后,用高滴度的野生型PCV2感染,比较仔猪从攻毒后28 d内体温、体重、PCV2 Cap特异性抗体水平、中和抗体水平、淋巴细胞增殖水平、外周血病毒载量和病理组织学的差异。结果表明,免疫PCV2突变毒株或PCV2灭活疫苗的仔猪在免疫的后期被高剂量野生型PCV2感染,体温体重不会发生显著的变化;与免疫PCV2灭活疫苗的仔猪相比,PCV2突变毒株免疫的仔猪在高剂量野生型PCV2感染后,机体在感染后期(感染后28 d)产生更多的PCV2特异性抗体和中和抗体、淋巴细胞增殖能力更强;免疫PCV2灭活疫苗和PCV2突变毒株的仔猪在免疫后期被高剂量野生型PCV2感染,仔猪肺脏和淋巴结不产生显著的病理变化。而低剂量野生型PCV2免疫后的仔猪在免疫后期感染高剂量野生型PCV2后,仔猪肺脏和淋巴结仍出现严重的病理变化。本研究发现PCV2 Cap与宿主gC1qR的相互作用在调控PCV2诱导的免疫反应中发挥重要作用,gC1qR是PCV2抑制机体免疫反应过程中的关键宿主调控分子;以缺失gC1qR结合活性的PCV2毒株为疫苗免疫仔猪,能使仔猪在免疫前期产生不亚于PCV2灭活疫苗的免疫保护,在免疫后期使仔猪产生更强的免疫保护。研究结果为进一步阐明PCV2抑制机体免疫反应机制提供新的理论依据,也为PCV2疫苗研发提供新思路。
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