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目的:研究康复训练联合甲强龙(methylpredisolone,MP)治疗对大鼠脊髓挫伤后组织形态学和运动功能的恢复效果,观察其对胶质瘢痕形成和神经再生的作用,并与MP单一治疗比较,深入全面探讨康复训练影响脊髓挫伤后神经功能恢复的机制,寻求最佳的康复训练方案,以期为今后开展有效的临床康复治疗提供实验依据。方法:1健康成年SD大鼠随机分为Sham组、Model组、MP组、MP+Ex组,采用PinPointTM精密皮质撞击器制备大鼠脊髓挫伤模型。伤后30 min尾静脉注射MP(30mg·kg-1·BW)。术后第1周起,MP+Ex组施予跑台训练,有规律地持续6周。利用Harris氏HE染色法结合Luxol固蓝染色观察损伤组织的形态学改变;采用免疫组织化学技术和PCR技术检测Nogo受体(NgR)和硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)的蛋白表达和基因水平。2将健康成年SD大鼠实验动物跑台上适应性训练6天,然后随机分为Sham组、Model组、MP组、MP+Ex组,制备大鼠脊髓挫伤模型。伤后30 min尾静脉注射MP(30mg·kg-1·BW)。术后第1周起,MP+Ex组进行6周有规律的康复训练。应用TreadScan步态分析系统评价各组大鼠伤后1、2、4、6周的步态行为学特征;采用PCR和Western-blot技术检测各组大鼠脊髓挫伤后1、2、3、5周脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA和蛋白的表达;伤后6周时,分别通过NeuN染色法和TUNEL染色法检测神经元存活情况和损伤区域神经细胞凋亡,并观察损伤部位星形胶质细胞中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性表达情况和检测GFAP mRNA水平。结果:1康复训练联合MP治疗可明显减轻组织溃变程度和增加残余髓鞘面积(P<0.05),而且显著降低NgR和CSPGs的免疫阳性区域面积及其mRNA相对表达量(P<0.05)。2(1)Model组大鼠术后后肢出现明显运动功能障碍,与单一MP药物治疗相比较,康复训练联合MP治疗能显著改善后肢跨步时间、脚印面积、步长、摆动时间、正常步序比及最小纵向偏差(P<0.05);(2)与Model组相比,MP组BDNF mRNA含量及蛋白水平仅在1周时明显升高(P<0.05),而MP+Ex组在伤后1、2、3、5周均具有显著性差异(P<0.05),并且在2、3周时BDNF mRNA和蛋白水平均较Model组上升更为显著(P<0.01);(3)康复训练联合MP治疗对神经元具有明显的保护作用(P<0.05),同时在损伤中心±3mm及±5mm处MP+Ex组神经元存活数量较之MP组显著增多(P<0.05)。伤后6周,Model组灰质后角有大量TUNEL阳性细胞表达,MP+Ex治疗可显著抑制TUNEL阳性细胞表达的增加(P<0.05)(4)康复训练联合MP治疗可以降低GFAPmRNA表达及蛋白含量(P<0.05),抑制星型胶质细胞的活化。药物治疗1周后适当的介入康复训练对SCI的治疗发挥有益的效果,并且随着时间的延长疗效优势更加凸显,2-3周的治疗效果为最佳。结论:康复训练联合MP治疗可以有效促进大鼠SCI后神经功能的恢复和重建,且疗效优于单一MP冲击治疗。这种联合疗法适宜长期使用,其主要机制可能是通过减少髓鞘脱失、抑制胶质瘢痕的形成,同时上调BDNF的表达,减轻神经元的凋亡,改善神经再生的微环境和运动功能,促进受损的脊髓修复和再生。