论文部分内容阅读
目的:研究同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)代谢酶亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)A1298C多态性、甲硫氨酸合成酶(MS)A2756G多态性,以及MTHFR A1298C和MS A2756G组成的联合基因型在新疆哈萨克族人群中的分布特点,探讨Hcy水平及MTHFR A1298C、MS A2756G多态性与新疆哈萨克族原发性高血压的关系;探讨MTHFR A1298C、MS A2756G单个基因突变及联合基因突变对血浆Hcy的影响。方法:采用随机整群抽样的方法,以生活在新疆塔城、伊犁、阿勒泰地区定居的哈萨克族人群为研究对象,进行标准化的问卷调查、体格检查。经流行病学问卷调查和体格检查后,按照2005年中国高血压防治指南制定的高血压诊断标准,收缩压(SBP)≥140mmHg和或舒张压(DBP)≥90mmHg,以及曾确诊高血压目前正在服降压药物者为高血压病例组(EH组),同一地区的的正常血压者为对照组(NT组),采用酶标免疫吸附检测法检测所有研究对象的血浆Hcy浓度,采用基因组DNA提取试剂盒及酚-氯仿法提取外周血白细胞基因组DNA,应用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测研究对象MTHFR基因A1298C、MS基因A2756G多态位点的基因型。分析EH组和NT组中基因型、等位基因、联合基因型的频率分布特点,比较上述两个多态位点各基因型携带者之间血浆Hcy水平的差别及其与高血压的相关性。结果:1)新疆哈萨克族人群存在MTHFR基因A1298C位点多态性,存在AA、AC、CC三种基因型和A、C两种等位基因。基因型AA、AC、CC分布频率分别为64.72%、30.84%、4.44%,等位基因A、C分布频率分别为80.14%、19.86%,符合Hardy-Weinberg平衡( x 2=0.414,P=0.813)。MTHFR基因A1298C多态位点的AA、AC、CC三种基因型在高血压组分布频率分别为67.98%、28.08%和3.94%,在正常对照组分布频率分别为61.78%、33.33%和4.89%;A、C两种等位基因在高血压组频率分别为82.02%和17.98%,在正常对照组等位基因分布频率分别为78.44%和21.56%,两组基因型和等位基因频率分布差异无统计学意义( x 2=1.806,P=0.405和x 2=1.714,P=0.190)。按性别分层,男性EH组和NT组间、女性EH组和NT组间MTHFR基因A1298C多态位点的AA、AC、CC三种基因型和A、C两种等位基因均无统计学差异。新疆哈萨克族高血压组血浆Hcy水平明显高于同族正常对照组(14.87±8.76 vs 11.15±5.21),有统计学差异(P<0.01)。按性别分类比较,男性EH组和NT组血浆Hcy水平均高于同组女性,分别为17.26±9.07(μmol/L)vs 12.65±5.04(μmol/L)和12.75±6.13 vs 9.82±5.09,差异有统计学意义(P<0.05)。男性、女性EH组Hcy水平均高于NT组,分别为17.26±9.07(μmol/L)vs12.75±6.13(μmol/L)和12.65±5.04(μmol/L)vs9.82±5.09(μmol/L),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。MTHFR A1298C多态位点AA、AC、CC三种基因型的血浆Hcy水平无统计学差异,分别为13.19±8.90(μmol/L)、12.24±4.77(μmol/L)、11.99±5.40(μmol/L)。AA、AC、CC三种基因型之间在年龄、BMI、SBP、DBP、FBG、BUN、Cr、UA、TC、TG、HDL、LDL、脂蛋白a各临床资料间均无统计学差异。年龄、BMI是新疆哈萨克族高血压发病的独立危险因素,而MTHFR基因A1298C位点多态性、血浆Hcy水平不是新疆哈萨克族高血压发病的独立危险因素。2)新疆哈萨克族人群存在MS基因A2756G位点多态性,存在AA、AG、GG三种基因型和A、G两种等位基因。AA、AG、GG分布频率分别为78.15%、20.19%、1.66%,A、G等位基因频率分别为88.24%、11.76%,符合Hardy-Weinberg平衡( x 2=0.3072,P=0.8576)。MS基因A2756G多态位点的AA、AG、GG三种基因型在高血压组分布频率分别为76.12%、21.39%和2.49%,在正常对照组分布频率分别为80.00%、19.09%和0.91%;A、G两种等位基因在高血压组频率分别为86.82%和13.18%,在正常对照组等位基因分布频率分别为89.55%和10.45%,两组基因型和等位基因频率分布差异无统计学意义( x 2=0.926,P=0.336和x 2=1.508,P=0.219)。按性别分层,男性EH组和NT组间、女性EH组和NT组间MS基因A2756G多态位点的AA、AG、GG三种基因型和A、G两种等位基因均无统计学差异。MS A2756G多态位点AA、AG、GG三种基因型的血浆Hcy水平分别为12.74±7.88(μmol/L)、12.95±5.04(μmol/L)、13.38±5.84(μmol/L),三种基因型血浆Hcy水平的差异无统计学意义。MS基因A2756G多态位点的AA、AG、GG三种基因型之间在年龄、BMI、SBP、DBP、FBG、BUN、Cr、UA、TC、TG、HDL、LDL、脂蛋白a各临床资料间均无统计学差异。年龄、BMI是新疆哈萨克族高血压发病的独立危险因素,而MS基因A2756G位点多态性、血浆Hcy水平不是新疆哈萨克族高血压发病的独立危险因素。3)新疆哈萨克族MTHFR A1298C和MS A2756G联合基因型存在8种联合基因型:AA/AA、AA/AG、AA/GG、AC/AA、AC/AG、CC/AA、CC/AG、CC/GG,但未发现AC/GG联合基因型。各联合基因型分别在EH组和NT组之间无统计学差异。以MTHFR 1298CC/MS 2756 AA基因型为对照,用非条件Logistic回归模型进行MTHFR A1298C基因型与MS A2756G基因型的联合作用与高血压的关系分析,提示MTHFR 1298AA/MS 2756 GG发生高血压的风险最高,OR值为1.80,MTHFR 1298CC/MS 2756 AG发生高血压的风险最低,OR值为0.240,但与MTHFR 1298CC/MS 2756 AA基因型比较无统计学差异。其余各联合基因型与MTHFR 1298CC/MS 2756 AA基因型比较均无统计学差异。MTHFR A1298C、MS A2756G各联合基因型的血浆Hcy水平之间进行比较,MTHFR 1298AA/MS 2756GG基因型的血浆Hcy水平最高,为13.30±3.56(μmol/L);MTHFR 1298CC/MS 2756AA基因型的血浆Hcy水平最低,为12.08±4.88(μmol/L),但两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。联合基因型各型之间比较血浆Hcy水平均无统计学差异。结论:1)新疆哈萨克族人群MTHFR基因A1298C、MS基因A2756G位点存在多态性表现。MTHFR 1298位点存在AA、AC、CC三种基因型和A、C两种等位基因;MS 2756位点存在AA、AG、GG三种基因型和A、G两种等位基因。基因型的分布均符合Hardy-Weinberg平衡;2)新疆哈萨克族MTHFR基因A1298C位点多态性与新疆哈萨克族高血压的发生无明显的相关关系。MTHFR基因A1298C点突变可能不是影响血浆Hcy水平的重要遗传因素。3)新疆哈萨克族MS基因A2756G位点多态性与新疆哈萨克族高血压的发生无明显的相关关系。MS基因A2756G点突变可能不是影响血浆Hcy水平的重要遗传因素。4)新疆哈萨克族高血压组血浆Hcy明显高于正常对照组,且血浆Hcy水平有性别差异,男性血浆Hcy水平明显高于女性;血浆Hcy可能是新疆哈萨克族高血压发生的危险因素,但不是独立的危险因素。5)新疆哈萨克族MTHFR 1298、MS 2756联合基因型与新疆哈萨克族高血压的发生无明显的相关关系。MTHFR A1298C、MS A2756G联合突变可能不是影响血浆Hcy水平的重要遗传因素。