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目的:作为钙黏蛋白家族的一员,PCDHGA9在细胞粘附、细胞间相互识别以及细胞核信号中承担着重要作用。已有研究证明钙黏蛋白在肿瘤发生、发展中发挥关键作用,但PCDHGA9的相关研究未见报道。本研究拟通过检测PCDHGA9在胃癌组织中的表达,揭示其临床意义及与患者预后的相关性;通过体内、体外实验,双向调控PCDHGA9的表达,揭示其在胃癌增殖、侵袭、转移和上皮间充质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)、细胞核信号传递中的重要作用。方法:1.通过基因芯片比较胃正常上皮细胞GES-1和高侵袭胃癌细胞系SGC-7901基因差异表达,进行聚类分析,发现具有研究价值的目的基因和相关通路;2.通过免疫组织化学染色检测,比较肿瘤组织与对应正常胃黏膜上皮中PCDHGA9的表达,探讨PCDHGA9与患者临床病理特征及患者预后的关系;3.通过基因转染和慢病毒技术,构建PCDHGA9稳定过表达和敲减细胞株,通过细胞功能实验,体外研究PCDHGA9与胃癌细胞自噬、凋亡及与增殖、侵袭的关系;4.通过激光共聚焦技术对β-catenin进行亚细胞定位,揭示PCDHGA9与β-catenin的相互作用以及对经典Wnt通路的影响;5.通过激光共聚焦技术对Smad2/3和p-Smad2/3进行亚细胞定位,揭示PCDHGA9对Smad2/3激活及核转位的作用;6.构建裸鼠皮下移植瘤和腹腔转移模型。体内检测PCDHGA9对胃癌细胞增殖、腹膜定植和转移能力的关系。结果:1.免疫组织化学染色结果显示相较于正常胃黏膜,PCDHGA9在胃癌组织中表达明显下调并且与胃癌TNM分期、UICC分级、分化程度以及肿瘤复发、转移关系密切(p<0.01)。Kaplan-Meier生存分析表明PCDHGA9低表达的患者总生存期(Overall Survival,OS)和无病生存期(Disease Free Survival,DFS)明显降低。2.体外和体内实验证明PCDHGA9可诱导胃癌细胞自噬、凋亡和G1期细胞周期阻滞,抑制胃癌细胞增殖及EMT;3.激光共聚焦和Western blot实验结果表明PCDHGA9通过与β-catenin相互作用来减少β-catenin解离到胞浆及发生核转位,抑制细胞增殖并减少β-catenin的核内堆积,负调控Wnt通路的活化;4.激光共聚焦和Western blot实验结果表明PCDHGA9通过抑制由TGF-β所诱导的EMT,可降低Smad2/3发生磷酸化以及其激活形式(p-Smad2/3)的核转位。结论:PCDHGA9可抑制胃癌细胞增殖、转移,并且PDDHGA9低表达可作为胃癌的独立预后因素。