[目的]本研究从不同润湿处理对牙本质胶原纤维网结构的影响、乙醇湿粘接的粘接效果以及乙醇湿粘接对牙本质粘接耐久性的影响三个方面对乙醇湿粘接和疏水性粘接剂的应用进行系统评价和分析,探讨其临床应用可行性和预测临床效果。研究共分三部分：第一部分是用场发射扫描电子显微镜(FESEM)和原子力显微镜(AFM)观察表征不同润湿处理后的牙本质胶原纤维网结构；第二部分则系统评价乙醇湿粘接和疏水性粘接剂在不同类型牙本质,包括正常牙本质、龋病影响牙本质以及根管内牙本质的粘接效果；第三部分为乙醇湿粘接和疏水性粘接剂体外粘接耐久性的评价。第一部分不同润湿处理对牙本质胶原纤维网结构的影响实验一不同润湿处理后牙本质胶原纤维网结构的观察[材料与方法]选取完整无龋的离体上颌第三磨牙20颗,水冷却下用慢速锯暴露冠中部牙本质,平行于牙本质面切取1.5mm厚牙本质片,纵向劈开成两片,分别用于FESEM和AFM观测。样本随机分为5组,酸蚀后,分别按按水润湿、无水乙醇润湿20秒、3×20秒、3×1分钟以及梯度乙醇润湿处理。FESEM观察牙本质胶原纤维网的结构,AFM观察其二维和三维表面形貌。[结果]FESEM图像显示酸蚀处理后玷污层消失,牙本质小管开放。随乙醇处理时间延长,胶原纤维网逐渐变得更为疏松,最后处于完全伸展状态,胶原间隙也逐渐增大。AFM三维形貌图显示,表面形貌随乙醇润湿时间延长和润湿程度加深而渐趋平缓。第二部分乙醇湿粘接的粘接效果评价实验二乙醇湿粘接对正常和龋病影响牙本质粘接强度和纳米渗漏的影响[材料与方法]选择32颗牙合面罹患慢性龋病的磨牙,在龋损指示剂的指导下去除软龋和病变累及的软化牙本质,保留颜色较深但坚硬的龋病影响牙本质。酸蚀后随机分为4组：对照组使用水润湿和Single Bond 2粘接,余下各组按无水乙醇润湿20秒、3×20秒以及梯度乙醇润湿分别处理,实验用疏水性粘接剂粘接。Charisma光固化复合树脂恢复牙冠至一定的高度,37℃水中存放24小时后,用低速锯将牙齿片切为0.9×0.9 mm2的微拉伸测试试件,然后在体视显微镜下将样本按正常牙本质和龋病影响牙本质划分。微拉伸强度测试检测各组粘结强度,FESEM观察粘接界面的纳米渗漏情况。微拉伸测试后,样本的牙本质端进行微硬度测试和元素分析。[结果]双因素方差分析显示牙本质类型(F=7.234,P=0.008)和粘接方案两个因素(F=22.959,P=0.000)对粘接强度有显著影响。粘结剂和牙本质的交互作用有统计学意义(P<0.05)。Single Bond 2在龋病影响牙本质的微拉伸粘结强度显著低于正常牙本质的粘结强度,使用无水乙醇润湿3×20秒以及梯度乙醇润湿处理,疏水性粘接剂粘接能显著改善龋病影响牙本质的粘接强度(P<0.05),减少纳米渗漏的发生。梯度乙醇润湿处理配合疏水性粘接剂粘接对正常牙本质粘接强度无显著影响(P>0.05),但能减少纳米渗漏现象。正常牙本质的微硬度显著高于龋病影响牙本质(P<0.001),两者在元素含量上都有一定差异。实验三乙醇湿粘接对根管内牙本质粘接强度和纳米渗漏的影响[材料与方法]选用因正畸拔除的前磨牙60颗,水冷却下用慢速锯截取牙根中上部分,沿颊舌向平行牙根长轴劈开,获得根管内牙本质切片。取20个切片,酸蚀后随机分为5组：分别按按水润湿、无水乙醇润湿20秒、3×20秒、3×1分钟以及梯度乙醇润湿处理,AFM测定表面纳米粘附力。余下切片酸蚀后随机分为5组：对照组使用水润湿和Single Bond 2粘接,其余各组按无水乙醇润湿20秒、3×20秒、3×1分钟以及梯度乙醇润湿分别处理,实验用疏水性粘接剂粘接。表面充填直径2.8 mm,高3-4 mm树脂并固化。24小时后用于剪切强度和纳米渗漏检测。[结果]单因素方差分析显示不同湿粘接方案对表面纳米粘附力和剪切强度均有显著影响(P<0.001)。与对照组相比,乙醇处理后表面纳米粘附力均显著下降(P<0.001),而且随着乙醇处理的时间延长,纳米粘附力也随之显著下降(P<0.05)。与对照组剪切强度相比,梯度乙醇处理配合疏水性粘接剂使用能显著提高根管内牙本质粘接的剪切强度(P<0.001),并减少纳米渗漏现象；无水乙醇处理20秒配合疏水性粘接剂使用则显著降低根管内牙本质剪切强度(P<0.05)。实验四乙醇湿粘接对边缘封闭性的影响[材料与方法]选择20颗因正畸拔除的前磨牙,水冷却下用高速涡轮机于离体牙的颊、舌侧牙颈部釉牙骨质界处制备近远中径3 mm、牙合龈径2 mm、洞深2 mm的箱形V类洞,酸蚀后随机分为5组：对照组使用水润湿和Single Bond 2粘接,余下各组按无水乙醇润湿20秒、3×20秒、3×1分钟以及梯度乙醇润湿分别处理,实验用疏水性粘接剂粘接。充填固化后,37℃水中存放24小时。样本室温下浸泡于0.5%的碱性品红溶液24小时,慢速锯沿颊舌向平行于牙体长轴将离体牙切割成1 mm厚薄片,40倍体视显微镜下观察同一充填体所有剖面的染料深入深度,根据分级标准测定评分。[结果]Mann-Whitney U检验显示,各组牙合壁微渗漏要显著低于龈壁(P<0.05)。组间微渗漏Kruskal-Wallis检验显示,梯度乙醇处理组在牙合壁和龈壁微渗漏程度上都显著低于其他组(P<0.05)。第三部分乙醇湿粘接对牙本质粘接耐久性的影响实验五正常及龋病影响牙本质乙醇湿粘接体外耐久实验[材料与方法]选择48颗牙合面患慢性龋病的磨牙,在龋损指示剂的指导下去除软龋和病变累及的软化牙本质,保留颜色较深但坚硬的龋病影响牙本质。酸蚀后随机分为3组：对照组使用水润湿和Single Bond 2粘接,余下各组按无水乙醇润湿3×20秒以及梯度乙醇润湿分别处理,实验用疏水性粘接剂粘接。Charisma光固化复合树脂恢复牙冠至一定的高度,24小时后,用低速锯将牙齿片切为0.9×0.9 mm2的微拉伸测试试件。然后在体视显微镜下将样本按正常牙本质和龋病影响牙本质划分。微拉伸强度测试分别检测各组24小时和体外存放6个月后的粘结强度,FESEM观察粘接界面的纳米渗漏情况,马森三色法染色后光镜下观察粘接界面。[结果]双因素方差分析显示粘接方案和存储时间两个因素对粘接强度有显著影响。粘接方案和存储时间的交互作用有统计学意义(P<0.05)。对照组正常和龋病影响牙本质样本,老化后粘接强度均显著下降(P<0.05)。与即刻粘接强度相比,正常牙本质使用3×20秒和梯度乙醇处理配合疏水性粘接剂粘接老化后强度改变无显著性差异(P>0.05)；龋病影响牙本质3×20秒和梯度乙醇处理组老化后粘接强度无显著变化(P>0.05)-使用商用粘接剂的样本其纳米渗漏现象在老化后明显加重,而使用疏水性粘接剂的样本其纳米渗漏现象以及粘接界面胶原暴露程度老化前后改变不明显。[结论]1.不同的润湿处理将影响胶原纤维网的结构。随着乙醇润湿的时间延长和程度加深,胶原纤维网内水分逐渐减少,间隙增大,整体结构更为疏松；但在空气中,乙醇的易挥发性将使胶原纤维网更易于塌陷,一定程度上增加粘接操作的技术敏感性。2.选择合适的乙醇润湿方案配合疏水性粘接剂的使用能改善龋病影响牙本质和根管内牙本质的粘接强度,减少微渗漏和纳米渗漏现象,将有望改善这些类型牙本质的临床粘接效果。3.选择合适的乙醇润湿方案配合疏水性粘接剂的使用能在一定时间内维持正常和龋病影响牙本质的粘接强度,并保持粘接界面结构相对完整,为延长牙本质粘接修复体的寿命带来希望。4.维持粘接界面结构的完整性,进一步改善牙本质粘接耐久性,必须全面考量引起粘接界面降解的因素和机理,综合运用各种有效手段。