ASK1一种新型启动子

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在研究拟南芥发育过程中,常常需要将所研究的基因在植物中过量表达,从而观察由此而可能出现的异位表型。此外,在图位克隆鉴定某些未知的基因时,也需要过量表达这些基因尝试互补突变体的表型。然而,在拟南芥遗传学研究中最常用的花椰菜花叶病毒35S启动子在花器官中,尤其在雄蕊中往往并不能做到持续而强烈地表达目的基因,所以有利用35S启动子无法互补突变体表型,或者观察不到异位表型的事例的报导。本研究中,我们将ASK1启动子和35S启动子与绿色荧光蛋白GFP的cDNA片段连接,构建转化质粒;转化拟南芥植物,筛选转基因植物;与此同时,我们将这两种启动子驱动表达GFP的报导系统转到拟南芥原生质体的瞬间表达体系中,观察ASK1和35S启动子的启动子驱动GFP在植物体内的,和在原生质体内的表达情况;,探讨ASK1启动了和35S启动子组成型表达的优缺点。我们发现在转基因拟南芥中,35S启动子在除了花粉中的其他组织都强烈地表达;而在拟南芥原生质体里,ASK1和35S启动子都能驱动GFP的表达。本实验进一步证明了35S启动子在研究雄性器官和雄配子体发生中的确具有很大的局限性。而ASK1启动子能在拟南芥的花粉里表达。因此,ASK1以做为雄性器官和雄配子体发生相关基因的启动子来进行研究。
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