15份番茄的品质分析及DNA指纹图谱

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoyixay
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本试验研究了15个番茄材料,对它们的品质进行分析,尝试借鉴AHP法(AnalyticHierarchyProcess)的分析思路,应用主成分法计算番茄品质性状各变量的权重,按AHP法的思路进行综合评价,即,变量值在分析前经过3种测度的转换,均转化为正向变量,然后进行以权重值为系数的线性评价函数的分析。运用改良CTAB法提取了材料的DNA,对RAPD反应条件、各反应试剂浓度和琼脂糖浓度进行了优化,对DNA进行RAPD-PCR扩增,得到15个番茄材料的DNA指纹图谱,并对DNA指纹图谱分析,其主要结果如下:1.品质分析得出,Li2固形物含量、番茄红素含量、Vc含量最高,酸度适中,可溶性总糖含量较高,综合得分最高,S-45综合得分最低。2.利用改良CTAB法提取了材料的DNA,其OD260/OD280比值在1.8~2.0之间,OD260/OD230大于2,经电泳检测,清晰可见,符合RAPD技术的要求。3.采用正交试验设计,建立了RAPD优化反应体系。所得最优体系为: 25ml中含有模板DNA40ng,引物0.25μmol/L,dNTP200μmol/L,Taqase 1.25U,10×PCR buffer 2.5μL,25m mol/L MgCl2,1.5μL,ddH2O 14μL。适宜的扩增条件为94℃预变性5 min,94℃变性30s,36℃复性30s,72℃延伸1min,40个循环后,在72℃保持7分钟。4.琼脂糖浓度在1.2%和1.4%时都能将不同的DNA分开,而且电泳图谱清晰可见,本试验选用1.2%的琼脂糖浓度。5.从40个随机引物中筛选出8个多态性好的随机引物,用这8个引物对15个番茄材料进行扩增,共产生42条带,其中多态性片段28条,多态率达66.7%,表明番茄各栽培品种在RAPD标记中所显示的遗传背景十分狭窄。引物a3可以将Li2和Li3与其它品种分开,引物a10可以将L-23与其它材料分开,引物a18可以将214#与其它品种相区分,引物a19可以将214#和4#和其它品种分开,引物c4可以将仿慧珠和L-23与其它品种分开,引物c5可以将S-45区分出来,引物c7可以将Li2和S-24与其它品种分开,引物c13可以将L-23区分开来。对供试15个材料进行了聚类分析,在系数为0.683时可以分为4个类。
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