小鹅瘟(Goose plague，GP)是由鹅细小病毒(Goose parvovirus，GPV)引起的一种主要侵害4～10日龄雏鹅的急性或亚急性败血性传染病，是危害养鹅业最严重的传染病之一。GPV属细小病毒科(Parvoviridae)、细小病毒属(Parvovirus)成员。含有两个开放阅读框，左侧阅读框编码非结构蛋白NS1、NS2，右侧阅读框编码结构蛋白VP1、VP2及VP3。其中NS1在病毒毒性、病毒复制及调节基因的表达方面发挥了重要的作用。试验通过对鹅细小病毒非结构蛋白NS1基因转化苜蓿的探索，研究植物转基因技术在表达鹅细小病毒抗原中的应用，为进一步研究鹅细小病毒NS1蛋白的生物学特性、揭示鹅细小病毒致病机理及研制口服疫苗提供科学依据。 根据Genebank上发表的GPVB株基因组核苷酸序列设计一对特异性引物，PCR扩增出鹅细小病毒非结构蛋白NS1全长基因，约2022bp，将其克隆到含有CaMV35S启动子的植物表达载体pBI121中，转化大肠杆菌JM109感受态细胞，构建了植物表达载体pBI121-NS1，利用改进的热激法将其导入农杆菌LBA4404，构建NS1植物双元表达载体，建立了农杆菌介导法转化苜蓿的载体系统。 选用紫花苜蓿“金皇后”2～5天的子叶、下胚轴和15天左右的幼嫩叶片为材料，诱导筛选出良好的胚性愈伤组织，以该愈伤组织为受体，通过叶盘转化法将GPV的NS1基因转化苜蓿，卡那霉素抗性筛选后，获得抗性植株52株。提取抗性植株叶片基因组DNA做PCR特异性扩增，扩增出了2022bp的目的片断，获得了6株PCR阳性植株，抗性植株的转化效率为11.5％，表明目的基因NS1已经整合到转基因苜蓿的基因组中。提取转基因苜蓿RNA，RT-PCR检测，结果显示，NS1基因在转基因苜蓿的转录水平表达。 本研究探索了苜蓿作为生物反应器在生产鹅细小病毒非结构蛋白NS1上的应用，为进一步研制鹅细小病毒可食化疫苗建立了牢固的理论基础，在预防和控制鹅细小病毒感染，促进畜牧业发展中具有重要的科学意义和经济价值。