光动力疗法对兔正常声带损伤的影响

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目的研究光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)中不同光敏剂浓度和不同光照剂量对兔正常声带组织的反应性特点及损伤修复情况,为PDT在咽喉科疾病的应用寻找安全剂量,并为光动力疗法在临床上治疗慢性声带炎症(chronic inflammation of the vocal cords)及癌前病变(precancerous lesions)做前期研究。方法将25只普通级日本大耳白兔按随机数字表法均分为5组,低功率低浓度组A[100 mW,10%盐酸氨酮戊酸溶液(5-aminolevulinic acid,5-ALA)]、高功率低浓度组B(200mW,10%5-ALA)、高功率高浓度组C(200 mW,20%5-ALA)、低功率高浓度组D(100 mW,20%5-ALA)及正常对照组E(自然光,等渗盐水),五组分别在干预后1 d、3 d、7 d、14 d、28 d观察比较声带组织损伤及损伤后修复情况。在光镜和电镜下观察声带的组织形态学变化,并行Masson染色、免疫组织化学染色、Alican Blue染色,观察细胞外基质(extra cellular matrix,ECM)中胶原纤维、纤维连接蛋白及透明质酸(Hyaluronic acid,HA)的变化情况,从而观察声带的损伤及修复情况。结果光镜下,PDT干预后A、B、C、D组声带组织均出现不同程度的炎症反应,上皮细胞不同程度的破坏,毛细血管不同程度增生,成纤维细胞增生,细胞外基质主要成分胶原纤维、纤维连接蛋白、透明质酸排列紊乱。A组炎症反应较轻,C组炎症反应较重,B、D组介于A、C组之间,A、B、C、D组1 d出现上皮细胞脱落,3 d出现成纤维细胞增生,声带固有层中胶原纤维、纤维连接蛋白、透明质酸含量出现升高,7 d含量最高,各组与正常对照组之间差异具有统计学意义(P<0.05),28 d声带固有层各成分含量趋于正常稍高水平,排列与正常对照组类似,电镜下PDT干预后28 d,A、B、C、D组声带组织细胞桥粒连接、半桥粒连接,声带损伤基本修复。光镜及电镜下观察声带粘膜结构表现基本一致。结论PDT光照剂量在100mW~200mW、光敏剂浓度在10%~20%之间时,其在声带的应用是安全的,兔正常声带经过适当剂量PDT干预后会出现可恢复性损伤,7 d后声带黏膜开始自行修复,约28 d时声带的结构和功能基本恢复,为PDT应用于慢性声带炎性疾病及癌前病变提供实验基础。
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