论文部分内容阅读
乙烯是植物的重要气态激素,产生于植物生长发育的各个阶段,是调节植物成熟与衰老的重要植物激素。然而许多植物病原真菌也可以自身合成乙烯,但真菌自身合成乙烯在植物与病原菌互作体系中的生物学作用尚不清楚。本研究以果蔬采后重要的致病真菌链格孢属菌(Alternaria)为试验材料,对该属真菌乙烯合成途径及其影响因素,以及它们的乙烯合成能力与致病性之间的关系进行了探讨,并建立了真菌乙烯的简易检测方法。研究结果显示：1、供试9种Alternaria均具有自身合成乙烯的能力。在添加10mM甲硫氨酸的PDA培养基上培养2天后,均可以检测到乙烯的合成。各株Alternaria的乙烯合成在第3-4天达到最高峰；各菌种间乙烯合成能力差异显著,其中合成能力最强的A5 (A.gaisen)菌株达0.3575μl/h,最低的AO (A.alternate)菌株为0.1375μl/h。2、Alternaria只能利用甲硫氨酸(Met)合成乙烯,该属真菌的乙烯合成途径为KMBA(2-酮基-4-甲基硫代丁酸)途径。供试各菌株不能将ACC(1-氨基环丙烷-1-羧酸)转化为乙烯；在各菌株的甲硫氨酸培养滤液中添加2,4-二硝基苯肼后,置于黑暗下均可出现因KMBA积累产生的黄色沉淀。3、环境条件可调节Alternaria的乙烯合成。低温,黑暗等条件会明显抑制Alternaria的乙烯合成,但抑制程度随菌种的不同而有所差异；高温和光照条件可促进Alternaria的乙烯合成; Alternaria在pH2-pH9的条件下均可以合成乙烯,其中在pH4和pH5的条件下乙烯释放量最高。寄主营养也具有促进该属菌产生乙烯的能力。4、Alternaria诱导寄主释放乙烯的能力与其致病力的强弱没有必然联系,但却于真菌自身合成乙烯的能力呈正相关,乙烯合成能力强的菌株致病能力也较强。5、改良传统的真菌乙烯检测手段,创建立了一种检测产孢真菌乙烯释放量的新方法。制备含有10mM甲硫氨酸和含有105spores/mL待检侧真菌孢子的PDA平板培养基,25℃下恒温培养。定时在平板上打取6mm的菌碟植入10ml青霉素瓶中,橡胶塞密封4小时后,取1ml气样注入气相色谱仪检测乙烯量。该法将传统的液体培养法改良为固体培养法,可连续并准确地检测到真菌乙烯的释放规律,减少了操作繁琐和容易污染的几率。在园艺产品采收以后,控制果蔬衰老过程中的乙烯释放和贮运环境中的乙烯浓度是延长果蔬保鲜期和货架期极其重要的措施之一。Alternaria是引起多种果蔬采后病害的主要病原,该属真菌自身合成乙烯的途径和产生条件尚未见报道。本研究为今后深入研究真菌合成乙烯的生物学作用提供了重要的理论和方法依据,也为今后更有效地控制果蔬贮运环境中的乙烯提供了新思路。