目的:慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是临床常见的肺系疾病,以慢性炎症侵犯气道、肺实质及肺血管为主要病理特征。TLR4/MyD88/NF-κB信号通路通过促进气道炎症因子释放、增加黏蛋白分泌,对COPD的发生发展尤为重要。COPD属于中医“肺胀”范畴,血府逐瘀汤在治疗COPD中取得良好疗效,抑制了气道炎症因子释放,但其作用机制目前尚不明确。目前血府逐瘀汤在气道炎症反应及其作用的相关通路的研究较少,本研究以实验小鼠及人体外周静脉血为研究对象,探讨血府逐瘀汤对慢性阻塞性肺疾病TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响及其可能的相关机制,为临床评估及治疗COPD提供更多的理论依据。方法:第一部分:探究血府逐瘀汤对COPD小鼠炎症因子释放及肺组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达的影响:香烟烟熏联合LPS滴鼻法进行COPD小鼠造模,持续造模120天,造模成功后,设置空白对照组、COPD模型组、阳性药物组、血府逐瘀汤低剂量组、血府逐瘀汤中剂量组、血府逐瘀汤高剂量组。给药30天后,观察各组小鼠造模及给药前后日常活动能力,饮食、呼吸频率、分泌物多少、毛色及体重变化。通过HE染色观察比较各组小鼠气管、支气管结构形态的改变、肺泡扩张、变形、融合,肺实质中性粒细胞浸润,血管变形、平滑肌增生等;ELISA检测小鼠肺泡灌洗液(BALF)及血清中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17水平;免疫组化检测小鼠肺组织TL-R4、MyD88、NF-κB蛋白水平。第二部分:探究血府逐瘀汤对人体外周静脉血单个核细胞(PBMCs)TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的调控:15例COPD患者及15例查体健康者外周静脉采集血液标本,密度梯度离心法分离PBMCs,确定PHA与血府逐瘀汤给药浓度,设置空白+PHA组、空白+PHA+中药组、COPD+PHA组、COPD+PHA+中药组四组。进行细胞培养,通过ELISA法检测 PBMCs 上清液中 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17 炎症因子水平,RT-PCR、western blot分别检测PBMCs细胞中TLR4、MyD88、NF-κB的mRNA和蛋白表达。结果:第一部分:血府逐瘀汤可以改善COPD小鼠的一般情况,可以防止小鼠过快的呼吸频率,咳嗽减轻、分泌物减少。电镜下HE染色可见血府逐瘀汤各组小鼠小气道、肺泡、血管的病理改变及炎性细胞的聚集均有不同程度的减轻,血府逐瘀汤各剂量组小鼠肺泡灌洗液及血清中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17的含量较模型组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化观察到血府逐瘀汤各组小鼠肺组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达较模型组更低。第二部分:COPD+PHA+中药组人体外周静脉血PBMCs上清液中TNF-α、IL-1β、IL-8、IL-17等炎症因子含量较COPD+PHA组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),IL-6轻度下降,差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR、western blot结果显示COPD+PHA+中药组人体外周静脉血PBMCs上清液中的TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达较COPD+PHA组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:血府逐瘀汤可以减少COPD小鼠血清、肺泡灌洗液及人体外周血单个核细胞内的炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-8、IL-17的水平,其机制可能是通过调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,实现对慢性阻塞性肺疾病起到治疗作用。