内生真菌(endophytic fungi)是指对植物体不能产生明显的病害症状,生活于植物组织内部的一类真菌。内生真菌在自然界植物体内十分广泛的存在着,近些年来的研究发现,植物的内生真菌可以得到新的、未知的产物,同时可以生成一些同宿主相同的产物,因而成为获取药用资源的新途径,受到广泛的关注。本文选取传统药用植物人参(Panax ginseng C. A.Meyer)地上部分的茎和叶片进行了内生真菌的分离,通过抑菌活性的筛选,确定从叶片中分离的菌株RL2为目的菌株。对该菌株的发酵产物的化学成分及药理活性进行了初步的研究。本文采用组织块分离法,从人参地上部分的茎和叶片中共分离出内生真菌46株,其中从茎中分离得到25株,叶中得到21株。选用大肠杆菌(Bacillus coli)、金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus)、肠炎沙门氏菌(Salmonellae enteritidis)、粪链球菌(S.faecalis)、阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为测试菌。对全部的46株内生真菌,其发酵产物包括发酵液和菌丝体进行抗菌活性筛选。结果表明,有15个菌株至少对4种测试细菌具有抑菌活性,其中菌株RAS9、RB5、RL2、RL3、RL9、RL10、RL21对测试细菌都显示出不同程度的抑菌效果,菌株RL2的抑菌效果尤为突出,对所有测试菌均表现出了较强的抗菌活性,其菌丝体乙醇提取物粪链球菌敏感程度较高,抑菌率为54.37%,其对大肠杆菌的抑制率达到61.72%,对肠炎沙门氏菌的抑制也有44.84%。菌株RL2菌丝体醇提液、发酵液都对6种测试菌有相对突出的抑制作用,可认为其有广谱性,可做为目的菌株。菌株RL2依据显微特征及分子鉴定为茎点霉属(Phoma sp.),占分离总数的21.7%。分离的结果显示了,在人参的叶、茎中,不同地方分离得到的内生真菌在种类、分布及数量上都有一定的差别性。选用不同的培养基及适宜的培养条件对菌株RL2进行发酵培养,筛选出来适宜菌株RL2生长的最优培养条件,并且对菌株RL2的发酵产物的化学成分进行了初步的研究,由于宿主植物人参的多糖及皂苷成分通常都具有很好的药理活性,因此,本文提取了多糖,皂苷成分。菌株RL2的发酵液中具有同宿主植物相同的三萜皂苷类成分,而菌丝体中也检测出了甾体皂苷类成分。本文对多糖成分进行了抗氧化活性实验,其中胞内多糖的活性同阳性对照Vc较为接近。说明其有很好的抗氧化活性。其清除作用随着浓度的增加而逐渐增大,呈现量效关系。当C=1mg/ml时,胞内多糖有较强的清除羟基自由基能力,其清除率为83.3%,其对超氧阴离子清除率为83.21%。对多糖的抗疲劳和缺氧的活性实验结果显示,该菌株RL2的胞内、胞外多糖具有很好的抗疲劳和缺氧活性,同宿主植物人参有相似性。菌株RL2的胞内、外多糖,高、中、低三个剂量组与空白组相比较均能够有效提升小鼠的活力,延长小鼠的游泳时间。在小鼠负重游泳后,对小鼠进行解剖。采肝,采血,对肝糖原量,血乳酸,血清尿素氮三项指标进行检测。结果显示,菌株RL2胞内、外多糖,高、中、低三个剂量组均能有效延长小鼠的游泳时间,降低运动后血清BUN浓度,提高肝糖元的储备量,增强清除乳酸能力。菌株RL2胞内、外多糖都能够有效提高小鼠耐缺氧的时间,延长小鼠在缺氧环境中的生存时间,其高、中、低剂量组同空白组相比都具有极显著差异(p<0.01)。