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研究目的
本研究采用荧光定量PCR(Fluorescent quantitative PCR，FQ-PCR)方法进行宫颈分泌物UU DNA检测，了解CIN/宫颈癌患者下生殖道UU感染情况和负荷量；并分别用杂交捕获Ⅱ代(HC Ⅱ)和导流杂交基因芯片技术(HybriMax)检测患者HPV感染情况，初步探讨UU感染、HPV负荷量与CIN/宫颈癌的相关性，以及UU感染、HPV基因型与CIN/宫颈癌的相关性。
材料和方法
1.研究对象选取2005年9月～2007年2月中山大学附属第二医院因CIN或宫颈鳞癌住院的病人150例为病例组，并将其分为四个亚组包括CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌组，或以CINⅠ为LSIL组，而将CINⅡ、CINⅢ、宫颈癌组合并为．HSIL及以上组。同期在中山大学附属第二医院体检中心进行体检的妇女，无泌尿生殖道炎症症状，无明显阴道炎体征者，按年龄段分层随机抽取300例为对照组。全部对象详细登记临床资料，常规妇科检查，白带常规检查排除淋球菌、念珠菌感染及细菌性阴道病。
2.荧光定量检测UU DNA对全体研究对象用棉拭子取样法采集宫颈管分泌物标本，提取UU DNA，PE9700荧光定量PCR仪进行UU荧光定量检测。
3.杂交捕获Ⅱ代检测HPV DNA选取57例患者以专用样本采集毛刷置于宫颈采集标本，提取DNA用PE9600PCR扩增仪及AutoCytePREP超薄液基细胞检测系统。
4.导流杂交基因芯片技术检测HPVDNA选取67例患者以专用样本采集毛刷置于宫颈采集标本，应用HybriMax医用核酸分子快速杂交仪进行HPV分型检测。
结果
1.一般临床资料病例组150例，年龄22-71岁，平均38.73±9.26，其中CIN Ⅰ 36例，CINⅡ35例，CINⅢ53例，宫颈癌26例，即LSIL36例，HSIL及以上114例。对照组300例，年龄20-55岁，平均38.49±7.51。
病例组和对照组年龄、职业构成、避孕方式比较差异均无统计学意义。两组孕次、产次、流产次数比较差异有统计学意义，病例组孕次、产次、流产次数均高于对照组。
比较CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌组年龄、初次性交年龄、初孕年龄，结果显示CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ各组年龄差异无统计学意义，CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ各组与宫颈癌组年龄比较差异均有统计学意义，即宫颈癌组年龄高于CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ各组。各组初次性交年龄、初孕年龄均无显著性差异。
2.UU检测结果病例组UU阳性率66﹪，其中CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、宫颈癌各组UU阳性率分别为47.2﹪、71.4﹪、71.7﹪、73.1﹪。CINⅠ、CINⅡ组UU阳性率比较，差异有统计学意义。CINⅡ、CINⅢ、宫颈癌各组UU阳性率比较则差异无统计学意义。LSIL组UU阳性率为47.2﹪，HSIL及以上组UU阳性率为71.9﹪，两组UU阳性率比较，差异有统计学意义。
对照组UU阳性率为38.7﹪。病例组和对照组之间UU阳性率比较，差异有统计学意义，OR=3.079。LSIL组与对照组UU阳性率比较差异无统计学意义，而HSIL及以上组与对照组UU阳性率比较差异有统计学意义。
应用两组独立样本非参数检验比较病例组和对照组UU定量结果，P=0.001，差异有统计学意义，对照组平均秩次高于病例组。应用K-W检验比较CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、宫颈癌各组UU定量结果，X<2>=4.030，P=0.258，四组间差异无统计学意义，即不同病变程度组UU负荷量无明显统计学差异。
3.HPV检测结果124例行HPV检测，其中CINⅠ27例，CINⅡ30例，CINⅢ46例，宫颈癌21例，即LSIL 27例，HSIL及以上97例。HPV总检出率75.8﹪，CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、宫颈癌各组HPV阳性率分别为44.4﹪、70﹪、95.7﹪、76﹪。LSIL组HPV阳性率为44.4﹪，HSIL及以上组HPV阳性率为84.5﹪，两组HPV阳性率比较，差异有统计学意义。
57例行HCⅡ检测，67例行HybriMax检测，两种方法HPV检出率比较，差异无统计学意义。
57例HCⅡ检测病例分组进行HPV负荷量统计分析，K-W检验结果示不同病变程度患者HPV负荷量的平均秩次不等，平均秩次由高到低依次为CINⅢ、宫颈癌、CINⅡ、CINⅠ组，即高危HPV负荷量由高到低依次为CINⅢ、宫颈癌、CINⅡ、C1NⅠ组。
67例行HybriMax检测，47例阳性，其中1例为单纯低危型HPV感染(2.1﹪)，5例为高危型HPV合并低危型/其他型HPV感染(10.6﹪)，1例为单纯其他型别感染(2.1﹪)，40例为高危型HPV感染(单型别或混合型别，占85.1﹪)。47例HPV阳性病例中，混合型别感染占38.3﹪，单型别感染占61.7﹪。出现频率最多的5个HPV型别依次是16型、58型、52型、18型、33型。
4．UU和HPV共同检出情况对124例病例UU和HPV检测结果进行统计分析，UU和HPV均阳性者73例，占58.9﹪，均阴性者18例，占14.5﹪，单独HPV感染21例，占16.9﹪，单独UU感染12例，占9.7﹪。UU和HPV一致感染率为73.39﹪，Kappa系数为0.342，P=0.000，UU和HPV检测结果的吻合度有统计学意义。
将UU定性结果与HPV定性结果进行偏相关分析，控制变量年龄、学历、职业、初次性交年龄、初孕年龄、避孕方法、孕次、产次、流产次数、伴侣是否吸烟，结果显示偏相关系数为0.321，P=0.001，相关关系显著。
34例行Uu和HPV负荷量的相关分析，r<,s>=0.074，P=0.667，结果无显著相关关系。
67例病例行Hybr。iMax检测，47例HPV阳性，其中HPV混合型别感染占38.3﹪，单型别感染占61.7﹪。HPV混合型别感染组病例中UU阳性率为85﹪，HPV单型别感染组病例中UU阳性率为81.5﹪，两者比较差异无统计学意义。
5.宫颈病变程度影响因素的分析年龄、学历、职业、初次性交年龄、初孕年龄、避孕方法、孕次、产次、流产次数、UU定性、HPV定性、伴侣是否吸烟与病变程度的相关性用多分类有序Logistic回归分析。结果显示：年龄、学历(大专及以上)、产次(1～2次)、UU阳性、HPV阳性对病变程度有显著影响，相关系数分别为0.112、-3.279、-2.427、1.274、1.427，OR值分别为1.119、0.038、0.088、3.575、4.208，职业、避孕方法、孕次、流产次数、伴侣是否吸烟无显著影响。
结论
1.女性下生殖道UU感染与CIN/宫颈癌有一定的相关性。UU感染与宫颈病变程度相关，尤其与：HSIL和宫颈癌相关。
2.CIN/宫颈癌患者中UU与HPV检出率存在平行关系，提示UU感染对HPV感染导致的CIN/宫颈癌可能存在协同作用。未发现UU负荷量和HPV负荷量存在明显相关性。