从apelin/APJ系统探索益气养精方对肺癌血管生成及侵袭转移的影响

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目的:探索益气养精方通过调节apelin/APJ系统对肺癌血管生成的作用机制。方法:分别用益气养精方、apelin-13、中药+apelin-13与对照组干预肺癌A549和H1975细胞,通过增殖、划痕、侵袭等实验观察各组对细胞的增殖、迁移、侵袭能力的影响,通过RT-qPCR、Western Blot观察血管生成相关因子在各组实验中RNA和蛋白的表达情况。建造感染荧光的小鼠荷瘤小鼠原位成瘤模型,用益气养精方、apelin-13、顺铂、中药+顺铂、中药+apelin-13以及空白组干预小鼠,通过体重改变、脏器指数及活体成像,观察肿瘤变化。结果:增殖实验观测到益气养精方较对照组细胞增殖明显减少;侵袭实验中,益气养精方组细胞数量明显少于对照组(p<0.05);RT-qPCR检测,益气养精方组中血管生成相关因子Apelin、APJ、HIF-1α、Smad3及VEGF表达较对照组表达偏低(p<0.05)。Western blot检测,益气养精方组中相关因子(VEGF、HIF-1a、PI3K)的表达量明显下调(p<0.05)。动物实验中,顺铂组和益气养精方+顺铂组的裸鼠体重均高于其它组;A549荷瘤小鼠益气养精方+顺铂组的脏器系数显著低于对照组的脏器系数(p<0.01);A549荷瘤小鼠给药三周后,仅中药+顺铂组的ROI的荧光强度低于第二周的结果。结论:1.益气养精方能拮抗apelin-13对肺腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力的作用;2.益气养精方能拮抗apelin-13对血管生成相关因子VEGF、HIF-1a、PI3K等起到一定的下调作用;3.益气养精方对荷瘤小鼠的生存起到一定的支持作用;4.益气养精方联合顺铂对荷A549的裸鼠有一定的疗效。
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