枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌的紫外诱变及对Cd2+生物吸附性能的研究

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本实验观察枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌出发菌株的单菌落形态、简单染色、革兰氏染色、芽孢染色,测定两种出发菌的生长曲线和吸附Cd2+的耐受性曲线并测定两种出发菌对Cd2+的吸附性能;紫外诱变枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌;探究吸附条件对两种突变株吸附Cd2+的影响并确定最佳的吸附条件;由两种突变株构成混菌体系,探究两种突变株之间的生态关系及不同混菌体系对Cd2+吸附性能。枯草芽孢杆菌和胶质芽抱杆菌出发菌株的生长曲线表明在36h基本达到稳定期。两种出发菌株对Cd2+的耐受浓度分别为120 mg-L-1和220 mg·L-1。在Cd2+浓度为30 mg·L-1、pH值为6、菌体浓度为20 mg·L-1、温度为30℃、吸附时间为120min的条件下,两种出发菌株对Cd2+的吸附率分别为72.57%和79.13%。紫外诱变致死率曲线表明两种菌的最佳诱变时间分别为90s和60s。通过突变菌株的耐受性能初筛和吸附性能复筛,枯草芽孢杆菌突变菌株18#简称枯突变株18#)对Cd2+的吸附率为79.84%,比出发菌株提高了7.27%,胶质芽孢杆菌突变菌株15#(简称胶突变株15#)对Cd2+的吸附率为83.45%,比出发菌株提高了4.32%。两种突变菌株传代五次后对Cd2+的吸附性能仍具有稳定性。单因素试验及正交试验表明枯突变株18#吸附Cd2+的最佳条件是pH值为6、菌浓度为40g·L-1、吸附时间为120 min、Cd2+,浓度为30 mg·L-1,吸附率达94.28%;响应面分析法表明胶突变株15#吸附Cd2+的最佳条件是pH值为7、菌浓度为25 g·L-1、Cd2+浓度为30 mg·L-1,吸附时间为150 min,吸附率达96.93%。混合菌系(枯突变株18#和胶突变株15#)最佳培养基组成为葡萄糖浓度15 g·L-1、牛肉膏浓度6 g·L-1、蛋白胨浓度10 g·L-1、NaCl浓度5 g·L-1。混合菌系生长曲线表明两种菌在混合培养基中按湿重比1:1混合时,呈竞争生长关系。探索同时加入不同混菌吸附剂对Cd2+的生物吸附,试验结果表明加入湿重相同的胶突变株15#使得枯突变株18#对Cd2+的吸附率下降17.79%;加入湿重比为1:3的胶突变株15#,枯突变株18#对Cd2+的吸附率提到了4.8%。探索差时加入质量相同的吸附剂对Cd2+的生物吸附,结果表明先用胶突变株15#对Cd2+吸附1 h,再使用枯突变株18#对Cd2+吸附1 h,有利于提高对Cd2+的吸附率,吸附率比单独使用枯突变株18#和胶突变株15#作为吸附剂分别提高了16.87%和0.66%。
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