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原发性肝癌是人类常见的恶性肿瘤,在我国,肝癌死亡率占恶性肿瘤死因的第二位。近年来,大量研究表明自噬与肝癌的发生发展和复发,以及化疗耐药等方面关系密切,因此深入研究自噬与肝癌的相关机制,可以为寻找更加有效的早期诊断和治疗肝癌的靶点提供新的依据。ASPP (Apoptosis Stimulating Proteins of P53)蛋白家族是一类调控肿瘤细胞凋亡的蛋白家族,包括ASPP1、ASPP2和iASPP。ASPP2是ASPP蛋白家族中的重要成员,能与p53结合并特异性增强p53与促凋亡基因启动子的结合,促进细胞凋亡,抑制肿瘤生长。我们前期研究发现ASPP2与肝癌的发生发展有着密切关系,但ASPP2对肿瘤细胞自噬的作用尚不清楚。本课题将针对ASPP2在肝癌细胞自噬中的作用进行深入研究。首先,我们通过体外细胞实验发现在营养缺乏的环境中,ASPP2下调可以促进肝癌细胞内自噬小体数量的增加,LC3I型向LC3Ⅱ转化增加,p62降解增强,而自噬抑制后,这种趋势消失,这说明ASPP2下调可以促进肝癌细胞自噬水平的增加。相反,ASPP2过表达可以抑制肝癌细胞的自噬。然后,我们发现ASPP2是通过调节自噬关键基因Beclin 1而调控细胞的自噬的,作用机制主要有两个方面：一方面ASPP2可以抑制Beclin 1的转录,这种抑制主要是ASPP2通过与RelA/p65、IλBα结合,抑制了IκBα的磷酸化,阻碍了RelA/p65被释放入核,最终抑制了RelA/p65结合到Beclin 1启动子区启动转录,抑制了Beclin 1的表达水平。另一方面,我们还发现ASPP2可以与Beclin 1蛋白直接结合,抑制Beclin 1与PI3KCIII形成复合物,同时也会抑制Beclin 1与UVRAG结合,最终抑制PI3KCIII酶活性的激活,抑制了自噬小体的形成。ASPP2通过以上两个机制调控了肝癌细胞的自噬水平。我们也发现ASPP2下调促进肝癌细胞自噬抑制了肝癌细胞的凋亡,增强了细胞在营养缺乏时的存活能力,以及耐受化疗药能力。本课题阐明了ASPP2在肝癌细胞自噬进程中的作用和机制,对于了解肝癌细胞自噬的调控机制有了新的认识,这将为肝癌细胞的诊断和治疗提供新的策略和新的靶点,为抗肿瘤药物的研发提供新的理论证据。