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固定化酶在化学生物学、生物工程、医学、环境工程及食品工业等学科领域的研究异常活跃。而固定化酶技术最为关键的是固定化酶载体的选择。与一般环氧基载体相比,接枝聚乙烯亚胺的环氧基载体具有一些特殊的优点。本文合成了表面接枝聚乙烯亚胺的载体材料,并用这种材料固定了乳糖酶,同时对固定化酶的性质进行了研究。以甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA).甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)为单体,以二甲基丙烯酸乙二醇酯(EGDMA)为交联剂,以过二硫酸钾为引发剂,在氯化钠溶液中进行悬浮聚合反应,合成环氧基载体。该载体分散性好,载体表面光滑,近似球形,是平均粒径为200μm的均一单分散颗粒。用EDTA法测定了载体上的环氧基含量为8.745mmol/g载体。环氧基载体易于进行修饰,可以与氨基发生反应,形成很强的、稳定的共价键。因此,在一定条件下将环氧基载体与聚乙烯亚胺溶液混合,进行氨基化反应,可以得到接枝聚乙烯亚胺的环氧基载体。表面接枝聚乙烯亚胺(PEI)的环氧基载体材料是一种新型的固定化酶的载体材料。该载体颗粒粒径分布比较窄,平均直径为400nm。另外,载体没有任何的聚合现象,表现出非常好的单一分散的特性。与传统载体相比,在固定化酶过程中,它可以为酶的吸附提供更大的表面积。用盐酸滴定法测定了载体上的氨基含量为0.25mmol/g载体。利用接枝聚乙烯亚胺的环氧基载体可逆固定化乳糖酶,研究了固定化pH值及固定化温度、固定化时间对固定化乳糖酶的影响。结果表明固定化反应初始酶浓度为4mg/ml,固定化时间为8h,反应介质的pH=7.0条件下,固定化酶的效果最好。同时研究了PEI-载体固定化乳糖酶的各种酶学性质,如最适反应pH值,固定化酶的热稳定性,重复操作性等。与游离酶相比,固定化酶最适pH值偏碱性,热稳定性有所增大,重复操作20次后仍能够保持最初吸附容量的90.0%。研究了固定化酶催化合成低聚半乳糖的影响因素,酶反应的底物浓度、反应时间等反应条件对固定化K.fradilis β-D-半乳糖苷酶催化合成GOS的产率具有较大的影响。通过酶法生成的GOS产率随着乳糖浓度的增加而增大,当乳糖作为底物浓度为150g/L,反应4小时时GOS的产率最大,为40g/L。