小麦三雌蕊突变体内生真菌的分离与鉴定及抑菌研究

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植物内生真菌与宿主共生的过程中,能产生与宿主功能相同或相似的次生代谢产物,宿主为内生真菌提供营养来源,同时内生真菌分泌的次生代谢产物提高了宿主的抗病性、抗逆性、抗虫性等。小麦是世界上重要的粮食作物之一,但受到病虫害的影响限制了小麦粮食产量,而增加小麦的产量和质量是解决粮食问题的主要手段之一,小麦三雌蕊突变体(TP)是彭正松教授多年培育出的能够稳定遗传的一个小穗具有三个雌蕊的突变体,三雌蕊性状由2D染色体长臂上的Pis1基因控制,与细胞质遗传无关,该突变体增加了小麦穗粒数,因而具有提高小麦产量的潜能。本研究以TP为材料,从健康小麦植株中分离内生真菌,鉴定其种属,并筛选对植物病原真菌有拮抗作用的内生真菌,为生防菌研究提供材料和理论依据,研究结果如下:1、采用组织分离法从健康的TP植株根、茎、叶中共分离出58株内生真菌,从根中分离出34株,茎中分离出14株,叶中分离出10株,通过形态学和分子鉴定58株内生真菌属于12个属,分别是镰刀菌属(Fusarium sp.)、节菱孢属(Arthrinium sp.)、被孢霉属(Mortierella sp.)、柱孢霉属(Cylindrocarpon sp.)、毛壳属(Chaetomium sp.)、黄丝曲霉属(Talaromyces sp.)、芽枝霉属(Cladosporium sp.)、格孢菌属(Pleosporales sp.)、雪球微座孢属(Microdochium sp.)、炭角菌属(Xylaria sp.)、小不整球壳属(Plectosphaerella sp.)、翅孢壳属(Emericellopsis sp.),其中镰刀菌属为优势菌种。2、以58株内生真菌为研究对象,以禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)、腐霉菌(Pythium sp.)、马铃薯干腐病菌(Fusarium solani(Mart.)Sacc)、玉米纹枯菌(corn sheath blight)和马铃薯早疫病菌(Alternaria solani.Sorauer)等5种植物病原菌为供试病原菌,采用平板对峙法和菌丝生长法筛选对供试植物病原真菌有抑制作用的TP内生真菌。结果显示,有44株内生真菌至少对1株供试病原菌有拮抗活性。3、以Talaromyces flavus G12菌株为研究对象,采用菌丝生长法检测其不同有机相萃取物对禾谷镰刀菌的抑制效果,以确定最佳萃取部位。并采用琼脂培养法和液滴法检测菌株最佳萃取部位对禾谷镰刀菌孢子形态和萌发率的影响。结果显示,菌株G12乙酸乙酯提取物对禾谷镰刀菌菌丝的抑制效果最佳,抑制率为85%。该部位萃取物可使禾谷镰刀菌菌丝生长畸形、膨大呈结节状生长,且抑制其孢子萌发,该菌抑制禾谷镰刀菌的机制还需进一步研究。
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