【摘 要】
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TRAIL(TNF Related Apoptosis Inducing Ligand),或称Apo-2L,为长281个氨基酸的Ⅱ型膜蛋白,分类归属TNF配体家族成员,是目前所知的四个死亡配体之一,具有特异性杀伤肿瘤细胞
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TRAIL(TNF Related Apoptosis Inducing Ligand),或称Apo-2L,为长281个氨基酸的Ⅱ型膜蛋白,分类归属TNF配体家族成员,是目前所知的四个死亡配体之一,具有特异性杀伤肿瘤细胞的功能.TRAIL的这种特异的肿瘤细胞选择性杀伤作用,显示出其在肿瘤治疗方面的巨大潜力.该文详细的报道了TRAIL重组蛋白中,全长基因cDNA的获得以及鉴定手段,重组质粒的构建、获得工程菌到诱导表达、建立纯化工艺以及目的蛋白特异性、活性鉴定的整个过程.也对研究中出现的各种问题和现象进行了充分的探讨.特别的,我们发现了在RT-PCR过程中扩增得到的TRAIL全长基因与GeneBank中人TRAIL开放阅读全长序列比较,所得基因序列在第825位碱基由T变为C,三联密码子由TTT变为TTC,虽然均编码苯丙氨酸,为同义突变,对该课题的研究不产生影响,但是否中国人TRAIL基因在第825位就是T而不是C,则有待于鉴定.同时也报道了我们在对重组蛋白的杀伤肿瘤效应的鉴定中,引入了目前国内外较为先进的磷脂酰丝氨酸外翻法(Annexin V法)以及细胞流式分析技术.
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