参附注射液对猪创伤性心脏骤停复苏后多脏器功能损伤的保护作用

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目的:研究早期应用参附注射液(Shenfu injection,SFI)对猪创伤性心脏骤停(Traumatic cardiac arrest,TCA)复苏后多脏器功能损伤的保护作用及可能机制。方法:国产健康雄性白猪21头,体重33.1±3.6kg。采用随机数字表法分为假手术组Sham组(n=5)、TCA组(n=9)及SFI组(n=7)。Sham组只经历气管插管及动静脉置管过程,不进行放血和心肺复苏(Cardiopulmonary resuscitation,CPR)。TCA组和SFI组在20 min内匀速释放总血容量的40%,然后经电刺激法诱发室颤5 min、CPR5 min。于CPR开始时,进行液体复苏,即在1h输入60%自体血容量的晶体液后,1h回输入50%所释放的血液。SFI组在TCA组的基础上于复苏后5 min静脉注射SFI1.0ml/kg,然后以1ml/kg的总量微泵维持6h。于基线、复苏后1、3、6 h 监测心率(Heart rate,HR)、平均动脉压(Mean arterial pressure,MAP),采集动脉血检测动脉血乳酸(Lactate,Lac)、pH值、氧分压(Pa02)、二氧化碳分压(PaC02);于基线、复苏后1、3、6、24 h时,采集静脉血评估肌钙蛋白I(Troponin I,TNI)、肌酸激酶同工酶(Creatine kinase isoenzyme,CK-MB)、神经元特异性烯醇化酶(Neuron specific enolase,NSE)、S100B、肌酐(Creatinine,Cr)、尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、肠脂肪酸结合蛋白(Intestinal fatty acid binding protein,IFABP)、二胺氧化酶(Diamine oxidase,DAO)、血清钠离子、钾离子、凝血酶原时间(Prothrombin time,PT)、及肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(Interleukins-6,IL-6)水平。复苏后24h动物安乐死,获取心、脑、肺、肾、肠的组织标本,用原位末端标记法(TUENL法)检测细胞凋亡程度,以及免疫组织化学染色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平。结果:1.三组动物复苏前一般情况及复苏结果比较:复苏前三组动物的体重、HR、EtCO2、MAP、Lac水平均无明显差异(p>0.05)。TCA组9头猪中有8头猪复苏成功,而Sham组和SFI组所有猪均复苏成功。2.三组动物血流动力学指标比较:与Sham组相比,TCA组的HR在复苏后1、3与6h,SFI组的HR在复苏后1、3h增高(均p<0.05);与TCA组相比,SFI组的HR在复苏后3、6 h明显降低,差异有统计学意义(均p<0.05)。与Sham组相比,TCA组的MAP值在复苏后1h明显降低(p<0.05),SFI组的MAP值在复苏后各时点无明显差异(均p>0.05);与TCA组相比,SFI组的MAP值在复苏后1、3与6h值虽有所提升,但差异无统计学意义(均p>0.05)。3.三组动物心肌损伤指标比较:与Sham组相比,TCA组的TNI水平在复苏后1、3、6与24h,SFI组复苏后3、6h均明显增高,差异有统计学意义(均p<0.05);与TCA组相比,SFI组的TNI水平在复苏后3、6与24h明显降低,差异有统计学意义(均p<0.05)。与Sham组相比,TCA组的CK-MB水平在复苏后1、3 h,SFI组的CK-MB水平在复苏后1、3与6h均明显高于Sham组,差异有统计学意义(均p<0.05);与TCA组相比,SFI组的CK-MB水平在复苏后1、3与6 h有所降低,但差异无统计学意义(p>0.05)。4.三组动物脑损伤指标比较:与Sham组相比,TCA组的NSE和S100B水平在复苏后1、3、6与24h,SFI组在复苏后3、6h均明显增高(均p<0.05);与TCA组相比,SFI组NSE和S100B水平在复苏后3、6与24h明显降低,差异有统计学意义(均p<0.05)。5.三组动物呼吸功能指标比较:三组动物的Pa02水平在基线及复苏后各时点的Pa02水平差异无统计学意义(均p>0.05)。三组动物的PaC02水平在基线时差异无统计学意义(p>0.05),具有可比性,TCA组和SFI组在复苏后各时点PaC02水平较Sham组有所降低,但差异均无统计学意义(均p>0.05)。6.三组动物肾损伤指标比较:与Sham组相比,TCA组的Cr水平复苏后24 h明显增高(p<0.05),SFI组的Cr水平在复苏后虽较Sham组有所增高,但差异无统计学意义(均p>0.05);与TCA组相比,SFI组的Cr水平在复苏后差异也无统计学意义(均p>0.05)。与Sham组相比,TCA组的BUN水平在复苏后1、3、6与24h,SFI组在复苏后3、6h明显增高(均p<0.05);与TCA组相比,SFI组的BUN水平在复苏后3、6h较TCA组已明显降低,差异有统计学意义(均p<0.05)。7.三组动物肠损伤指标比较:与Sham组相比,TCA组的IFABP和DAO水平在复苏后3、6h明显增高(均p<0.05),SFI组的IFABP水平在复苏后3 h较Sham组升高(p<0.05),DAO水平虽在复苏后6 h较Sham组升高(p<0.05)。与TCA组相比,SFI组的IFABP和DAO水平在复苏后3、6与24 h明显降低,差异有统计学意义(均p<0.05)。8.三组动物血清电解质及凝血功能指标比较:三组动物在复苏后各时点的血清钠离子、钾离子水平及凝血酶原时间差异均无统计学意义(p>0.05);三组动物血清钠离子、钾离子水平及凝血酶原时间组内及组间差异均无统计学意(P>0.05)。9.三组动物动脉血乳酸及PH值比较:与Sham组相比,TCA组的乳酸水平在复苏后1、3h,SFI组在复苏后3、6h明显增高(均p<0.05);与TCA组相比,SFI组的乳酸水平在复苏后1、3h较TCA组明显降低,差异有计学意义(均p<0.05)。与Sham组相比,TCA组及SFI组的PH值在复苏后1、3 h均有所降低,但差异无统计学意义(p>0.05);与TCA组相比,SFI组的PH值在复苏后1、3h有所升高,但差异也无统计学意义(p>0.05)。10.三组动物血清炎症因子水平比较:与Sham组相比,TCA组和SFI组的TNF-α水平和在复苏后1、3、6与24h均明显增高(均p<0.05);与TCA组相比,SFI组的TNF-α水平在复苏后3、6与24 h明显降低(均p<0.05)。与Sham组相比,TCA组的IL-6水平在复苏后1、3、6与24h,SFI组在复苏后3、6与24h均明显增高(均p<0.05);与TCA组相比,SFI组的IL-6水平在复苏后3、6与24 h明显降低(均p<0.05)。11.三组动物主要脏器细胞凋亡程度比较:与Sham组相比,TCA组与SFI组在复苏24 h时均存在组织细胞凋亡,表现为心、脑、肺、肾、肠组织细胞凋亡指数增高及凋亡标志蛋白Caspase-3的表达增加(均p<0.05);SFI组心、脑、肺、肾、肠组织凋亡指数较TCA组降低,但差异均无统计学意义(p>0.05),SFI组的各组织Caspase-3表达较TCA组减少,其中心、肺组织Caspase-3表达差异有统计学意义(均p<0.05)。结论:猪创伤性心脏骤停复苏后出现多脏器功能损伤,早期应用参附注射液能够减轻脏器损伤程度,其机制可能与抑制全身炎症反应、减轻细胞凋亡有关。
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