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自从1982年Warren和Marshall从慢性活动性胃炎患者的胃粘膜中分离出幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，H.pylori）以来，H.pylori受到了极大的关注。现在认为H.pylori是慢性胃炎的主要致病因素，与消化性溃疡、胃癌及胃粘膜相关性淋巴样组织淋巴瘤的发生发展关系密切，WHO和国际抗癌联盟已将H.pylori列为Ⅰ类致癌物。H.pyori还可以通过慢性持续性的感染，引起免疫反应，与胃肠外多种疾病有关，如冠心病、急性心肌梗塞、儿童生长迟缓及格林巴利综合征等。 H.pylori的人群感染率高，推测全球近一半人感染过该菌。H.pylori在人体感染时间长达数十年，甚至有些人终生携带该菌。疫苗接种将是预防H.pylori感染最有效的方法。兔疫研究初期使用的是H.pylori的超声粉碎抗原，粗制抗原含抗原成分较多，存在交叉免疫反应，副反应较大。最近报道了脂多糖、粘附素、热休克蛋白、全菌抗原、尿素酶、空泡毒素（VacA）和毒素相关蛋白（CagA）及过氧化氢酶等疫苗抗原可诱导保护性抗体的产生，但各种抗原组分都有优缺点。目前研究最多的是尿素酶抗原，尤其是尿素酶B亚单位（Ure B）的特异性更受重视。迄今国内外虽已有多篇研究报道，但目前尿素酶疫苗的研究仍存在一些问题，如H.pylori菌株的多样性增加了开发抗H.pylori疫苗的难度。我们根据ure B的保守序列，人工合成了Ure B核心多肽，以克服H.pylori菌株尿素 2001浙江大学硕士学位论文酶的变异性。尿素酶ureA、ureB是结构基因，但为了避兔H．pylon尿素酶变异株的影响，本课题应用国际标准株、临床分离株及尿素酶突变株混合菌液制备尿素酶（全长）蛋白，用以制备多克隆lgG抗体，建立血清游离H．Pylon UreB及UreBtsG、UreB－IgA、UreBtsM三型兔疫复合物的酶免疫测定法。以验证H．pylon阳性患者血清中是否存在 Ure B，讨论 Ure B能否引起特异性的免疫应答以及免疫应答的形式，探讨 Ure B核心多肽作为疫苗抗原的可能。 142例临床收集的患者，经1999年H．PylOOi阳性科研诊断标准（H．PylOOiIgG、RUT或UBT、MB染色，三项中任二项阳性）诊断，其中61例H．pylon阳性。61例阳性患者血清检测结果进行统计学分析。本研究血清游离 UreB阳性率63．9％，UreB－IgG阳性率62．3O，UreB－IgA阳性率75．4O，UreB－IgM阳性率78．7％，四项联检任一项阳性有60例，阳性率为98。4％。联检阳性率显著高于单项的阳性率。而在 39例游离 UreB阳性的血清中，UreBtsG阳性率刀石％，UreB伦A阳性率74．4％，UreBteM阳性率76．9％，三项免疫复合物联检任一项阳性有37例，阳性率94．9％。联检阳性率显著高于单项的阳性率。进一步分析发现血清与 UreB－IgG型复合物之间的相关性有统计学意义，而游离 Ure B与UreBtsA型、UreB－IgM型复合物以及三型免疫复合物之间的相关性均无统计学意义。61例血清四种形式 UreB的检测结果见表 1。 表 161例 H．pylon阳性患者血清游离 UreB及 UreB－IgG、UreB－IgA、 UreB伦咖三型免疫复合物检测结果 方法 阳性 阴性 游离 UreB 39 22 UreB－IgG＊38 23 UreB－IgA 46 UreB－IgM 48 13 一 2一 2001浙江大学硕士学位论文基于以上工作，可得到如下结论： 1．建立了血清 H．pylon UreB及其兔疫复合物的酶免疫测定法。 2．H．pylon感染患者血清中存在游离UreB，UreB能引起特异性兔疫应答， 并能形成特异性免疫复合物。不同患者所引发的免疫应答类型不同，形 式有 IgG型、IgA型及 IgM型等； 3．血清游离UreB与UreB－IgG型免疫复合物相关，而游离UreB与 UreBtsA、UreB－IgM型兔疫复合物以及三型免疫复合物之间均无相关 性； 4·H．pylofi UffB核心多肽具有特异性的抗原表位，从而为 UreB核心多肽 作为H．pylon疫苗抗原提供了理论依据。