灵芝是中国传统医学中重要中药材之一,具有多种药理学作用。迄今为止,国内外对于灵芝的功效成分和保健作用已进行大量的研究。课题组前期研究发现甾醇类化合物是灵芝子实体,孢子中含量较高的生物活性物质,并对机体能起到多种调节作用,然而黑灵芝甾醇类化合物活性的文献报道相对较少。本论文对黑灵芝甾醇提取,分离纯化,抗菌活性,体外抗氧化活性进行了研究。主要结果如下:1.以麦角甾醇和游离甾醇的提取率为指标进行单因素实验,根据乙醇比例、时间和温度进行响应面设计,确定单次浸提游离甾醇得率最高的工艺条件为:乙醇比例100%,水浴温度76.3°C,时间4 h,理论最大得率6253μg/g,对试验进行验证得黑灵芝游离甾醇得率6092μg/g。2.本文研究了麦角甾醇,麦角甾醇酯与黑灵芝甾醇组分的抗菌活性差异,在对细菌的抑制试验中,黑灵芝甾醇组分的抗菌能力强度总体高于麦角甾醇和麦角甾醇酯标准品,但三种受试样品对两种青霉均未表现出抑制作用。此外,对黑灵芝氯仿萃取物中甾醇单体化合物的分离纯化,分别以Daigesol,μBondapark,Kromasil色谱柱进行分离纯化得到单体化合物7,22-麦角二烯酮。3.通过DPPH,MCC,ABTS研究了黑灵芝甾醇组分的抗氧化实验。在体外抗氧化实验中,黑灵芝甾醇组分表现出一定的抗氧化活性,在多个试验中自由基最高清除率为25.86±1.14%。4.而在研究对过氧化氢诱导的Caco-2氧化损伤模型的保护作用的实验中,黑灵芝甾醇组分及麦角甾醇的添加清除细胞内的自由基产生,促进SOD,GSH-Px的分泌,抑制MDA的产生和LDH的释放,从而对氧化损伤细胞起到保护作用,使细胞存活率增加。本研究以黑灵芝甾醇组分为研究对象,对其分离纯化及生物活性进行了一定研究,为保健食品以及药物开发提供了一定的理论基础。