【摘 要】
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目的:探讨角膜新生血管中AQP-1的表达情况。研究RNA干扰抑制水通道蛋白-1对血管内皮细胞迁移能力的影响。 方法:应用RT-PCR法检测角膜新生血管中的AQP-1的表达。体外培养
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目的:探讨角膜新生血管中AQP-1的表达情况。研究RNA干扰抑制水通道蛋白-1对血管内皮细胞迁移能力的影响。 方法:应用RT-PCR法检测角膜新生血管中的AQP-1的表达。体外培养人血管内皮细胞(HUVEC),设计并合成特异性针对人AQP-1的RNA干扰片段,用脂质体转染入血管内皮细胞,RT-PCR法和Western Blot法检测RNA干扰效果。TRANSWELL实验和损伤愈合实验观察转染后血管内皮细胞迁移能力的改变。 结果:角膜新生血管中均检测到AQP-1的表达,与对照组相比有显著性差异(p<0.01)。转染24h,48h和72h后AQP-1 mRNA表达下降,分别为正常对照组的11.3％,17.4%和29.7%,与正常对照组相比其差异有统计学意义(p≤0.05)。转染36h,48h,72h后 AQP-1蛋白表达水平下降为对照组的31.7%,54.9%和64.3%(p≤0.05)。TRANSWELL实验和损伤愈合实验提示转染AQP-1 siRNA后血管内皮细胞的迁移能力有明显下降,与正常对照组相比有统计学差异(p≤0.05)。 结论:角膜新生血管中存在AQP-1的表达,AQP-1可能在角膜新生血管的形成中起一定作用。AQP-1特异性siRNA能有效抑制AQP-1的表达并明显降低血管内皮细胞的迁移能力。
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