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家族性高胆固醇血症(Familial Hypercholesterolemia, FH)是一种常染色体显性遗传疾病,且绝大部分是由LDLR基因发生可遗传变异所导致的。FH患者体内严重缺乏具有正常功能的低密度脂蛋白受体(LDL receptor, LDLR),导致血浆中低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol, LDL-C)浓度异常增高,并可能由此引发动脉粥样硬化、冠心病、心肌梗塞等心血管疾病。由于前蛋白转化酶枯草溶菌素9(Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type9, PCSK9)已被证明能够介导LDLR的降解,因此成为FH治疗途径中一个很有潜力的靶点,近年来科学家们也在积极寻求针对PCSK9的安全有效的抑制方法。microRNA(miRNA)是长约22nt的单链非编码RNA,可在转录后水平下调其靶基因的表达,在生物机体正常新陈代谢、疾病的发生与发展等众多过程中发挥着重要的调控作用。本研究首先使用特定引物选择性地扩增与RNA诱导沉默复合体(RNA-Induced Silencing Complex,RISC)结合的mRNA,以此筛选出miR-24可能的几个靶基因,再通过双荧光素酶报告基因检测分析以及蛋白质印迹等方法证实了miR-24与人源PCSK9(hsa-PCSK9)的靶向关系,并确定了两者的直接作用位点。之后,我们研究了miR-24对PCSK9下游蛋白的影响,表明miR-24可以间接上调HepG2细胞中LDLR的蛋白水平。最后在HEK-293T细胞、HepG2细胞、BEL-7402细胞中研究了miR-24对细胞脂质摄取能力的影响,结果显示,过表达miR-24可促进人类肝来源细胞(HepG2细胞、BEL-7402细胞)对LDL的摄取作用,而在几乎不表达PCSK9的人胚肾上皮细胞(HEK-293T细胞)中则观察不到类似的效果。此外,我们还研究了miR-24对鼠源PCSK9(mmu-PCSK9)的影响,发现miR-24对mmu-PCSK9没有明显作用。综上所述,本研究证明PCSK9(Homo Sapiens)为miR-24的一个靶基因,并且miR-24可通过下调PCSK9表达量从而促进人类肝来源细胞对LDL的摄取。这一发现也有望为家族性高胆固醇血症及相关疾病提供新的治疗方案。