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第一部分金黄色葡萄球菌生物膜在腹透管的体外静置模型建立目的：建立腹膜透析管—腹膜透析液系统金黄色葡萄球菌生物膜(BF)的体外静置模型。方法：(1)采用刚果红平板法初步定性临床分离MRSA菌株能否形成BF。(2)以腹膜透析管为载体,采用腹膜透析液—50%Luria-Bertani液作为培养液,在24孔板中建立金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus, S.aureus) BF体外静置模型,分别于建模第3天和第7天,行琼脂平板菌落计数法、结晶紫染色法；同时用银染法、扫描电子显微镜(scanning electron microscope, SEM)观察腹透管表面形成的BF。结果：(1)我院临床分离MRSA菌株34134之菌落在刚果红平板中变黑,周边稍褪色。(2)培养3天,腹透管银染后光镜下观察,可见团块状、棉絮样的BF, SEM观察腹透管表面可见早期BF；培养7天,腹透管银染后光镜下观察,可见体积更大的团块状、棉絮样的BF,SEM观察腹透管表面可见具有立体结构的成熟BF。(3)培养3天、7天行琼脂平板菌落计数,结果显示第7天菌落数多于第3天,差异有统计学意义(P<0.01)；培养3天、7天行结晶紫染色BF半定量法,结果显示第7天酶表值高于第3天,差异有统计学意义(P<0.01)。结论：1.我院临床分离MRSA菌株34134能成功形成生物膜。2.以腹膜透析管为载体,采用腹膜透析液—50%LB作为培养液,在24孔板中能成功建立金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus, S aureus) BF的体外静置模型,3天形成早期膜,7天形成成熟膜。第二部分米诺环素对腹透管金黄色葡萄球菌生物膜的体外干预作用目的：探讨米诺环素对腹透管金黄色葡萄球菌BF的破坏作用,以及其对BF内金黄色葡萄球菌的杀菌作用。方法：(1)首先检测米诺环素对S. aureus的最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)。(2)分空白对照组、1/2MIC米诺环素组、1MIC米诺环素组、2MIC米诺环素组,于建模第3天、第7天分别加入上述不同浓度药物组,经作用24小时(hour, h)后,SEM、银染法观察腹透管表面BF及同步行结晶紫染色法；经作用4、8、24h后,采用琼脂平板菌落计数法行腹透管表面活菌计数。结果：(1)米诺环素对S.aureus的MIC. MBC分别是8ug/ml、128ug/ml。(2)无论是培养3天,还是培养7天,米诺环素作用24h后,SEM、银染后光镜观察腹透管发现,1MIC米诺环素组、2MIC米诺环素组腹透管表面BF结构体积较空白对照组明显减小,且2MIC米诺环素组表面BF结构体积小于1MIC米诺环素组。(3)无论是培养3天,还是培养7天,米诺环素作用4、8、24h后琼脂平板菌落计数法行腹透管表面活菌计数,结果显示1MIC米诺环素组、2MIC米诺环素组活菌数较1/2MIC米诺环素组、空白对照组减少显著,有显著性差异(P<0.01),2MIC米诺环素组活菌数比1MIC米诺环素组减少有统计学差异(P<0.01)；且随着米诺环素作用时间延长,米诺环素作用8小时活菌数少于4小时活菌数,同时作用24小时其活菌数少于8小时活菌数(P<0.01),但BF内细菌不能完全清除。无论是培养3天,还是培养7天,米诺环素作用24小时后行结晶紫染色法,结果显示1MIC米诺环素组、2MIC米诺环素组酶表值较1/2MIC米诺环素组、空白对照组减少显著,有显著性差异(P<0.01),且2MIC米诺环素组酶表值比1MIC米诺环素组减少有统计学差异(P<0.01)。结论：米诺环素具有破坏S. aureus的早期及成熟BF作用,并能减少早期及成熟BF内S. aureus的活菌数,且随着其作用时间延长,活菌数有减少趋势。