基于电泳沉积法制备血管支架纳米颗粒载药涂层的工艺研究

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药物洗脱支架(Drug-eluting Stent,DES)因其微创、高效以及能明显降低介入治疗术后再狭窄率等特点,成为心血管疾病治疗的首选器械。支架载药涂层是DES区别于传统裸金属支架(Bare Metal Stent,BMS)的最重要结构,是连接支架平台与病变部位血管壁的重要媒介,常与一些如支架后血栓、再内皮化延迟、慢性炎症等严重术后并发症密切相关,支架载药涂层制备技术在DES研究中占有极其重要的地位。目前,DES载药涂层的制备主要采用基于物理方法的浸涂法和喷涂法,基于纳米载药技术和现代电化学技术,电泳沉积(Electrophoretic Deposition,EPD)与载药纳米颗粒自组装(Self-assembly Method,SAM)可实现载药纳米颗粒与血管支架的结合,在一定程度上克服了基于传统物理方法存在的缺陷。本文基于EPD原理进行载雷帕霉素(Rapamycin,RAPA)聚乳酸-羟基乙酸共聚物(Poly(lactic-co-glycolic Acid),PLGA)纳米颗粒(RAPA-PLGA-NPs)药物洗脱支架涂层的制备,并取得如下成果:(1)采用乳化溶剂挥发法制备载雷帕霉素药物PLGA纳米颗粒,采用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)测定雷帕霉素药物的含量,研究建立了测定的色谱条件、标准曲线,并进行了方法学考察。通过单因素实验,研究载药纳米颗粒制备工艺中表面乳化剂聚丙烯酸(Polyacrylic Acid,PAA)浓度、水油相体积比、药物载体PLGA浓度及药物RAPA浓度等对RAPA-PLGA-NPs载药量和包封率的影响。通过正交实验优化,发现最佳载药纳米颗粒制备工艺为:PAA浓度为0.2%,水油相比20:1,PLGA浓度25mg/ml,RAPA浓度3mg/ml。基于优化的实验参数制备载药纳米颗粒的平均载药量5.57±0.12%,平均包封率为51.94±1.13%,工艺稳定性和重复性良好。(2)搭建了基于EPD原理的支架载纳米颗粒涂层制备实验平台,完成了血管支架载雷帕霉素PLGA纳米颗粒涂层的制备。通过单因素实验,研究了支架涂层制备工艺中沉积电压、沉积时间及沉积液溶质浓度对载药支架载药量、涂层厚度及涂层表面质量的影响。通过正交实验优化,发现最佳的涂层沉积工艺为:沉积电压7V,沉积时间25min,沉积液溶质浓度1.3mg/ml。基于优化的参数制备的载RAPA-PLGA-NPs药物洗脱支架的平均载药量为91.72±7.74ug,载药量稳定可控,工艺重复性良好,涂层质地均匀,与支架基体结合力良好。(3)基于恒温震荡法研究了EPD法制备的载RAPA-PLGA-NPs药物洗脱支架的药物释放特性。根据实验测得支架的体外药物释放曲线,结果表明载纳米颗粒涂层支架的释药速率呈先快后慢的趋势,1h释药量约24.44%,24h释药量约42.23%(释药一天内无明显药物“突释”现象),而后释药速率逐渐减缓,16天累计释药量超过90%,28天释药基本完全。通过对比分析目前商用载雷帕霉素药物洗脱支架的释药曲线,表明本文采用EPD法制备的载RAPA-PLGA-NPs药物洗脱支架具有良好的药物缓释特性。
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