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幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，简称H．pylori或HP）感染是慢性胃炎、消化性溃疡的主要致病因素，而且与胃癌的发病密切相关，世界卫生组织已经将其列为I类致癌因了。HP I型菌株含有－37kD左右的cag毒力岛，而Ⅱ型菌株缺少此毒力岛。西方国家报道cag毒力岛阳性的菌株引起胃癌的几率明显升高。cag毒力岛能够编码VirB／D的类似物，并能组装成一个针筒状的Ⅳ型分泌系统。此外此毒力岛还能编码HP的主要毒力因子CagA蛋白。HP可以通过Ⅳ型分泌系统将CagA注入到细胞内。序列分析显示CagA是一种亲水性蛋白，但众多的实验发现CagA被HP注入细胞后，位于细菌与细胞接触的部位的细胞膜中。在细菌与细胞接触的部位，细胞会形成一个底座将细菌托起，CagA便位于底座的尖部。因此，是什么作用促使CagA产生聚集值得探讨。CagA与EPEC的Tir有许多相似的地方。两者均是通过细菌的分泌系统进入细胞，均被磷酸化，并能引起细胞骨架重排和底座形成。在EPEC的细胞膜外面有Tir的配体Intimin，此配体与Tir的结合导致Tir总是聚集在EPEC与细胞接触的部位，位于细胞底座的尖部。并且当先使Tir在细胞内表达，再用Intimin的蛋白脂质体作用于细胞时，能够引起Tir聚集到Intimin脂质体作用的部位。本实验先用HP攻击AGS细胞，在攻击后的4h、6h、8h、10h、12h和24h分别用抗CagA的多克隆抗体进行免疫荧光检测，结果发现CagA均成簇地分布在细菌与细胞接触的部位，并没有随时间延长而扩散到细胞内的其他部位。免疫共沉淀和Western Blot显示CagA已经进入细胞。本实验构建了表达CagA的真核表达载体pEGFP-N3-cagA和pcDNA3-cagA。与由HP注入细胞内的CagA不同，在细胞内表达的CagA呈现均匀的膜分布。进一步用cagA缺失的菌株26695△cagA攻击表达了CagA的AGS细胞，CagA并没有像EPEC的Tir那样随Intimin的作用而产生聚集现象。用26695和26695△cagA菌株分别攻击AGS细胞，电镜结果显示细胞均能产牛底座。因此，CagA可能不像Tir那样，在细菌表面拥有自己的配体，CagA之所以位于HP与细胞接触的部位，可能是由于其被注入细胞后与细胞内的某种成分发生了结合。本实验用抗CagA的单克隆抗体进行免疫共沉淀（IP），将IP产物进行双向电泳（2－DE），将2－DE胶上的蛋白质斑点进行酶解以及质谱鉴定（MALDI－TOF和MS/MS），以及数据库检索。结果发现多种细胞骨架相关的蛋白，如beta actin、tubulin、cytokeratin、villin 2、lamin A/C isoform 2。因此CagA有可能和这些蛋白相结合而导致其聚集。
HP与AGS细胞作用后能够引起细胞发生蜂鸟状改变。对于此机制许多学者进行了研究，但各类观点都存在一些差异。本研究发现多聚阳离子转染试剂能够引起AGS细胞产生蜂鸟状改变，此种形态改变与HP引起的细胞形态改变极其相似。通过2－DE，本实验研究了PEI和HP作用下，AGS细胞的蛋白质组变化，结果发现两者引起的蛋白质组变化极其相似，为HP引起的细胞信号通路的研究提供了新的线索。同时由于在研究HP引起的细胞形态改变时经常用到转染技术，因此转染时应避免使用多聚阳离子转染试剂。