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目的:检测三种抗氧化剂-槲皮素(quercetin)、维生素C(Vitamin C,Vc)和维生素E(Vitamin E,VE)对小鼠体外受精胚胎发育的影响,探讨胚胎发育与H2O2含量的关系,为改善体外受精胚胎发育,建立高效的胚胎体外生产体系奠定基础。
方法:本实验以昆明小鼠为实验对象,CZB为基础培养液,在其中分别添加不同浓度的三种抗氧化剂-槲皮素(0.1、0.2、0.5、1、2、5和50μmol/L)、维生素C(50、100、200和400μmol/L)和维生素E(100、200、400和800μmol/L),比较它们对小鼠体内受精1-细胞胚胎体外发育的影响,测定其克服小鼠胚胎体外发育阻滞、促进胚胎发育的最佳浓度。然后将三种抗氧化剂分别添加入体外受精胚胎培养液中,观察三种抗氧化剂对小鼠体外受精胚胎发育的作用,并测定培养液中的H2O2含量。
结果:随着槲皮素浓度的升高,小鼠体内受精胚胎囊胚发育率逐渐升高,至0.5μmol/L时达最高。维生素C和维生素E也可以促进小鼠体内受精胚胎发育,维生素C在50μmol/L时胚胎囊胚发育率最高,维生素E在100μmol/L时囊胚发育率最高。将三种抗氧化剂(槲皮素、50μmol/L维生素C和100μmol/L维生素E)分别添加到体外受精胚胎培养液时,槲皮素对体外受精胚胎4-细胞发育率的促进作用较明显,而50μmol/L维生素C对体外受精胚胎囊胚发育率的促进作用较明显,与其它各组相比,有显著性差异(p<0.05)。同时发现,2-细胞胚胎培养24h后,体外受精胚胎培养液内H2O2含量较高,且培养液中H2O2含量越高,胚胎的发育情况越差。
结论:槲皮素、维生素C在一定浓度范围内对体外受精胚胎发育有促进作用。0.1、0.2和0.5μmol/L的槲皮素能克服2-细胞发育阻滞,有利于体外受精胚胎发育;50μmol/L的维生素C能明显提高小鼠体外受精胚胎的囊胚发育率。培养液中H2O2含量与胚胎发育情况呈负相关。