构树叶提取物对DSS诱导的小鼠结肠炎的缓解作用

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炎症性肠病(Inflammatory Bowel Disease,IBD)是慢性炎症反应引起的一种消化道疾病,严重影响畜禽和人类的健康,而其发病机制尚不明确,药物治疗有明显的毒副作用,易复发。众多研究报道,植物提取物可以缓解葡萄糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导的结肠炎,如杜仲提取物、白术提取物、黄芪提取物,其缓解机制可能与其所含有的活性成分有关。构树叶提取物(Broussonetia papyrifera leaf extract,BPE)是一种从构树叶中提取含有黄酮、多酚、多糖等活性成分的物质,具有抗氧化、抗炎、抗菌、促肠道健康等功能。因此,本试验旨在研究BPE对IBD小鼠的缓解作用。试验一构树叶提取物成分及生物活性分析试验结果如下:1)100 mg BPE中含有34.362 mg总酚、6.772 mg黄酮、18.181 mg总糖。氧自由基清除率为45.531%。2)BPE中含有奎宁酸、京尼平苷酸、咖啡酰奎宁酸、1-隐绿原酸、咖啡酸、柠檬酸等。3)100、50、25 mg/m L BPE溶液对常见细菌有着不同程度的抑菌作用。与对照组相比,不同浓度BPE组均对大肠杆菌W25K、ST鼠伤寒沙门氏菌、大肠杆菌ATCC 35150、大肠杆菌8700 1.558、产气荚膜梭菌ATCC 9120、肠炎沙门氏菌CMCC S007有抑菌或杀菌作用。这表明BPE对IBD的缓解作用可能因为BPE的抗氧化和抗菌活性。试验二构树叶提取物对IBD小鼠氧化应激及肠道屏障的影响选用C57BL/6雌性小鼠36只(20-25 g,11周),分为四组:对照组、DSS组(添加DSS)、BPE组(添加BPE)和DSS+BPE组(添加BPE和DSS)。试验结果如下:1)与对照组相比,DSS组小鼠体重显著减轻(P<0.05)、肝脏器官指数极显著增加(P<0.01)、脾脏器官指数显著增加(P<0.05)、小鼠腹泻;与DSS组相比,DSS+BPE组小鼠体重增加至与对照组无显著性差异,同时BPE显著缓解了DSS诱导的肝脏指数增加(P<0.05),表明IBD小鼠建模成功且BPE能够缓解DSS引起的小鼠体重减轻、器官指数增加。2)与对照组相比,DSS组小鼠结肠隐窝结构不明显,肠道屏障受损;与DSS组相比,DSS+BPE组明显改善小鼠结肠隐窝损坏情况,缓解结肠炎,以上结果表明BPE可以改善DSS对小鼠结肠粘膜的损害。3)相比于对照组,BPE组和DSS+BPE组的AHR蛋白(芳香烃受体)表达极显著上升(P<0.01),DSS组Nrf2(核因子NF-E2相关因子)蛋白表达有下降的趋势(P=0.06);与DSS组相比,BPE组和BPE+DSS组AHR蛋白表达显著上调(P<0.05),DSS+BPE组Nrf2表达显著性上调(P<0.05),以上结果表明BPE可以通过激活抗氧化通路相关蛋白(AHR和Nrf2),缓解小鼠肠道损伤。4)相比于对照组,DSS组肠道紧密连接蛋白claudin-1(P<0.01)、occludin(P<0.05)、ZO-1(P<0.05)蛋白表达显著下调,DSS+BPE组claudin-1表达显著下调(P<0.05),occludin和ZO-1表达无显著性差异,表明BPE的添加使DSS小鼠紧密连接蛋白表达水平回升至接近正常水平。5)与对照组相比,DSS组显著降低了Chao1(P<0.05)、ACE(P<0.05)指数。在门水平上,相较于对照组,DSS组与DSS+BPE组厚壁菌门丰度(Firmicutes)丰度显著降低、拟杆菌门(Bacteroidetes)丰度显著增加、软壁菌门(Tenericutes)显著性降低,DSS+BPE组疣微菌门(Verrucomicrobia)丰度增加。在属水平上,与对照组相比,BPE组Faecalibaculum丰度显著升高,DSS+BPE组Bacteroides丰度显著升高,DSS+BPE组Akkermansia丰度显著升高。以上结果表明BPE可以增加IBD肠道菌群丰富度,增加优势菌丰度。综上所述,BPE可作为一种缓解小鼠IBD的功能性物质。
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