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卵母细胞在发生、发育和成熟的过程中,细胞质中积累了大量的蛋白质和mRNA,这些物质不仅为正常的胚胎发育、基因组激活提供良好的物质储备,而且也是胚胎能够获得启动卵裂和分化能力的物质基础。因此,卵母细胞的质量直接影响和决定其受精后早期胚胎发育的命运。但是至今人们对卵母细胞发生、生长发育和成熟的分子机理尚不十分清楚,所以有必要对GV~MII期卵母细胞的基因表达情况进行分析研究。在卵母细胞生长期后,用于受精后支持早期胚胎发育的物质,与哺乳动物典型的体细胞相比,其含量的增加非常显著。生长期完成后,卵母细胞进入减数分裂Ⅰ期,此时RNA的合成速度下降到测不出的水平,但是卵母细胞已经贮存了足够的rRNA、tRNA、mRNA与核蛋白体,以便在受精后合成蛋白之用。母源mRNA是以不被翻译的形式稳定的贮存在卵母细胞中。本研究利用单卵DDRT-PCR技术对成年绵羊GV期和MII期的卵母细胞mRNA进行了比较,又以绵羊幼羔超排的卵作为存在成熟缺陷、受精率低的负面模型与成年绵羊的卵进行了MII期的mRNA表达差异比较。经过PAGE和银染定性分析,得到差异表达条带,经回收筛选测序,未得到成熟相关差异表达基因。然而,通过利用qPCR检测成年绵羊单卵体外成熟过程中空白对照组和E-64添加组0h(GV)、8h、16h、24h(MII)四个时间点CTSB、CTSS及GAPDH的cDNA数量,得出CTSB及CTSS的mRNA相对数量变化情况。成年绵羊单卵CTSB mRNA的表达数量在体外成熟培养过程中,在不添加E-64的情况下,CTSB mRNA的相对数量在0h(GV期)、8h、16h一直处于上升趋势,各时间点差异显著,在24h(MII期)降到8h的数量水平。CTSS mRNA的相对数量在8h、16h、24h(MII期)差异不显著,比0h都有所上升,差异显著。经过E-64处理的试验组,CTSB mRNA的相对数量在0h、8h、16h仍然处于上升趋势,各时间点差异显著,但是24h与16h差异不显著。CTSS mRNA的相对数量按时间递增顺序比较,差异都不显著,然而0h和16h时的数据差异显著,呈缓式变化。经过E-64处理的试验组,CTSB和CTSS的mRNA相对数量整体较对照组的数量有所降低,差异显著。