番红花(Crocus sativus L.)离体快繁及无病毒植株的培育

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番红花(Crocus sativus L.)系鸢尾科(Iridaceae)番红花属(Crocus)多年生草本植物。原产西班牙、土耳其、希腊及伊朗等国。最初由印度传入我国西藏,也有藏红花、西红花之别称。番红花株丛矮小,叶片纤细、芳香宜人、花大色艳,观赏性极强。适宜于点缀草坪,也可作花坛、花境,或配置于岩石园,亦可盆栽摆放于案头,是点缀庭园和装点居室的的好材料。番红花一直是我国传统名贵中药,近年来又发现番红花具有良好的抗癌活性,使其成为现今大力开发研究的热点资源植物。由于其独特的色泽和气味,番红花还是一种珍贵调味剂、香料和染料。番红花在我国能开花但不能受精结籽,主要靠分球无性繁殖。分球繁殖不仅繁殖系数低,而且导致番红花品种感染了包括芜菁花叶病毒(TuMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、鸢尾花叶病毒(IMV)、烟草脆裂病毒(TRV)以及炭疽菌、镰刀菌、青霉菌、链格孢菌等在内的多种病原菌,开花率和药用产品产量均受到严重影响。本研究的目的在于,以番红花球茎为试验材料,改善番红花离体快繁的技术,提高试管球茎的诱导率和移栽成活率,同时探索出操作简便、效果稳定的无毒番红花培育体系,为建立番红花高效的脱毒与快繁体系,尽快实用化奠定基础。研究结果表明,球茎用75%乙醇60 s外加0.1%升汞12 min消毒处理,污染率仅10.0%,芽萌发率达63.3%;球茎是最佳外植体,诱导球茎发芽的最佳培养基为MS+2.0 mg/L6-BA+0.5 mg/LNAA,出芽率达96.7%;芽丛的最佳继代增殖培养基为MS+2.0 mg/L6-BA+0.3mg/LNAA,增殖系数高达3.47;最适合的瓶苗增殖培养的温度条件是在18±2℃。番红花试管苗在离体培养下可以发育成试管球茎。试管球茎的最佳诱导条件是MS+5.0mg/L6-BA+3.0 mg/LNAA+0.3 g/LAC+2g/L多效唑+50g/L蔗糖,其球茎诱导率可以达到80%。番红花试管球茎移栽定植,成活率受基质影响不大。大于0.5g的球茎移栽成活率较高,球茎越大成活率越高。由于番红花茎尖取材难度大,加之耐热性较差,其0.5 mm以下微茎尖成活率低,剥取难度大,因此番红花无毒苗的获取可采用操作难度不大的昼高夜低(36℃/18℃)的变温处理结合茎尖培养与化学处理结合茎尖培养2种方法。本研究利用这2种脱毒方法培育出了不含CMV、TuMV、TRV及IMV等4种病毒的番红花植株。无毒番红花在生长势、开花量、花朵大小、药用产品的产量及观赏性等方面是否有变化,是需要今后进一步研究的课题。
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