γ-氨基丁酸A受体配基结合片段在大肠杆菌中的表达及其结构研究;脱辅基细胞色素b562的再设计以及再设计蛋白ING的部分非折叠中间态的动力学和结构特征

来源 :中国科学院上海生物化学研究所 中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yanweiwch
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全文由两部分组成.第一部分,γ-氨基丁酸受体配基结合片段在大肠杆菌中的表达及其结构研究.γ-氨基丁酸A受体(GABA<,A>,typeAgamma-aminobutyricacidreceptor)在中枢神经系统抑制突触传递中扮演着重要角色,也是药物如benzodiazepine类镇定剂的靶体.通过从两端逐步删除Cys166/Leu296片段,对其结构进行了详细的研究.结果表明,GABA<,A>受体α1-亚基从Cys180到Met293的区域,是维持结构域和结构完整和稳定所必需的.从园二色谱可见在其C-端或N-端的进一步删除都会使其二级结构崩解.第二部分,脱辅基细胞色素b562的再设计以及再设计蛋白ING的部分非折叠中间态的动力学和结构特征.细胞色素b562(cytochromeb<,562>),含106个氨基酸,由4个α-螺旋和一个血红素辅基组成.我们用突变实验观察了脱辅基细胞色素b562的再设计蛋白ING的折叠行为.结果表明,在ING的折叠过程中,中产蝗二个α螺旋于限速过渡态时形成,N-末端和C-末端的α螺旋在限速过渡态后形成.而且先折叠的部分也是折叠过程的限速步骤.
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