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目的:研究蛋白酶体抑制剂MG-132对体外培养的人结肠癌HCT-116细胞株增殖和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制,为结肠癌的药物治疗提供依据。方法:采用不同浓度的(0.5-15μmol/l)MG-132和阴性对照组作用于人结肠癌HCT-116细胞株,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测吸光度值,计算对照组和各实验组细胞的生长抑制率;应用流式细胞仪(FCM)研究MG-132对人结肠癌HCT116细胞株细胞周期和凋亡的影响,计算细胞凋亡率;应用RT-PCR方法检测对照组和不同药物浓度组作用于人结肠癌HCT-116细胞后bcl-2、p27、caspase-3 mRNA表达水平的变化;应用Western Blot法检测细胞bcl-2、p27、caspase-3在蛋白水平的表达情况。结果:(1)MTT法显示不同药物浓度组均可抑制HCT-116细胞的生长,呈时间和剂量依赖性,实验组与对照组及各实验组之间差别均有统计学意义(P<0.05)。(2)流式细胞仪(FCM)检测后发现经不同浓度MG-132作用48小时后,HCT-116细胞均出现凋亡,可见细胞周期S期明显抑制,且随着浓度的增加HCT-116细胞周期G0/G1期比例增加,S期细胞比例下降,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)RT-PCR检测表明,经不同浓度MG-132作用48小时后HCT-116细胞的p27、caspase-3 mRNA的表达随MG-132浓度增加而增加,bcl-2 mRNA的表达随MG-132浓度增加而下降(P<0.05)。(4)Western Blot法结果显示经MG-132作用48小时后HCT-116细胞的p27、caspase-3蛋白表达随MG-132浓度增加而增加,bcl-2蛋白表达随MG-132浓度增加而下降(P<0.05)。结论:(1)MG-132可以抑制体外培养的人结肠癌HCT-116细胞生长,呈时间和剂量依赖性,将细胞周期阻滞于G0/G1期,诱导细胞凋亡。(2)MG-132对HCT-116细胞生长抑制和诱导凋亡作用可能与上调p27、caspase-3基因转录和蛋白表达,下调Bcl-2基因转录和蛋白表达有关。