肠球菌(Enterococcus)是一种兼性厌氧性革兰氏阳性菌,属于人和动物肠道内的共生细菌,现已成为主要的机会致病菌。在肠球菌属中,粪肠球菌和屎肠球菌可导致人类和动物的许多感染,如心内膜炎、败血症、犊牛腹泻、仔猪关节炎和羔羊脑炎等,给养殖业带来经济损失。宁夏地区奶牛养殖业发展迅速,然而滥用抗生素现象较严重,导致肠球菌的耐药菌株不断出现,给养牛业的发展和人类健康带来潜在危害。因此,了解宁夏地区牛源肠球菌的耐药情况,及时反馈耐药信息,对临床合理使用抗菌药物具有重要的指导意义。本试验采集宁夏部分地区规模化养殖场奶牛肛门拭子,使用显色培养基及PCR法对肠球菌进行分离鉴定;采用CLSI(2012)推荐的药敏纸片琼脂扩散法(K-B法)测定肠球菌对16种抗菌药物的敏感性并进行了多药耐药性分析;最后采用PCR法对耐药基因与肠球菌毒力基因进行检测。1.2016-2018年采集宁夏地区部分奶牛场奶牛肛门拭子,进行肠球菌的分离鉴定。通过观察肠球菌显色培养基上细菌菌落形态、革兰氏染色镜检和PCR扩增屎肠球菌与粪肠球菌特异性基因的方法进行肠球菌的鉴定,结果鉴定出屎肠球菌78株,粪肠球菌53株。2.采用PCR方法对其他疑似肠球菌进行16S rRNA鉴定,结果鉴定出其他肠球菌124株。故本次试验共鉴定出255株肠球菌,其中屎肠球菌占30.59%,粪肠球菌占20.78%,其他种类肠球菌占48.63%。3.对255株肠球菌进行16种抗菌药物的敏感性试验,结果显示,所分离的肠球菌对磺胺异噁唑和杆菌肽耐药率最高,达到了 100%;其次对苯唑西林(92.16%)、红霉素(65.88%)、四环素(65.49%)和青霉素(56.86%)的耐药率也较高。对万古霉素和利奈唑胺高度敏感,敏感率分别为92.54%与95.29%。分离菌最多耐受13种药物。4.采用PCR方法对255株肠球菌进行了 9种耐药基因和7种毒力基因的检测。结果显示,氨基糖苷类耐药基因aph(3)’-m的检出率最高,为100%;其次是红霉素类耐药基因ermB,为46.27%;未检测出耐万古霉素耐药基因VanA、VanB、VanC。已检测的毒力基因明胶酶gelE的携带率最高,为37.65%;其次为心内膜炎抗原efaA,为36.08%。综上所述,本研究通过对宁夏部分地区牛源肠球菌进行分离鉴定、耐药性分析及耐药基因和毒力基因的检测,初步揭示了本地区牛源肠球菌的耐药情况及耐药基因与毒力基因的流行情况,为指导临床合理使用抗菌药物及预防耐药菌传播提供了理论依据。