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药用植物在人工引种及推广扩大栽培范围的过程中,由于改变了其原有的生长环境,会引起植物次生代谢物的变化,从而导致药用植物的质量发生改变。生物类黄酮在自然界分布广泛,近年来,随着研究方法和技术的不断提高,发现了许多新的种类和生理作用,特别是抗自由基及抗癌和防癌的作用。本文研究圆齿野鸦椿叶片乙醇提取物乙酸乙酯相所含化合物、及其总黄酮的醇溶超声波提取方法;研究了不同栽培环境(海拨、温度、降雨量、土壤等因子)、不同采收季节以及不同施肥方案等措施对黄酮积累的影响,为圆齿野鸦椿药用价值的综合开发提供理论及技术支持,主要结果如下:1、利用乙醇为提取溶剂,对圆齿野鸦椿叶片进行超声波提取,再通过有机溶剂石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次对粗提物进行萃取,收集乙酸乙酯相萃取物,用于GC-MS分析。GC-MS的测试中共检测出77个峰,鉴别出其中的29种物质,主要有醇类,苯类、酮类、酯类、酸类化合物。其中醇类化合物共5种,相对含量为1.0358%,酸类化合物共4种,相对含量为81.2077%,苯类化合物4种,相对含量为0.2759%,酮类化合物3种,相对含量为0.9135%,胺类化合物4种,相对含量为0.2577%,烷类化合物2种,相对含量为0.3511%,酯类化合物1种,相对含量为0.0865%,酚类化合物1种,相对含量为1.891%,烯类化合物1种,相对含量为0.037%。2、叶片总优化黄酮提取工艺:通过单因素试验确定影响圆齿野鸦椿叶片总黄酮提取率的4个因素的3个正交水平,分别为料液比(1:20、1:30、1:40),乙醇浓度(60%、70%、80%),超声波功率(175 W、200 W、225 W),超声波时间(25 min、30 min、35 min)。利用上述4个因素的3个水平建立L934的正交设计表,通过极差分析法得料液比、乙醇浓度、超声波功率、超声波时间四个因素对圆齿野鸦椿叶片总黄酮提取率的影响的主次顺序为超声波时间>料液比>乙醇浓度>超声波功率。以总黄酮的高提取率为目标,故最佳方案为A1B3C2D3,即料液比为1:20,乙醇浓度为80%,超声波功率为200 W,超声波时间为35 min钟。因乙醇浓度80%、超声波时间35 min为正交试验的上限,通过提高浓度、延长时间补充试验,仍确认其为最佳值。3、探索了主要栽培环境因素对圆齿野鸦椿叶片黄酮积累的影响:随着海拔的升高,黄酮的含量也随之升高,总黄酮的含量随着有机质含量的增加而降低,降雨与速效钾都有助于圆齿野鸦椿叶片总黄酮的积累。其中对圆齿野鸦椿叶片总黄酮的积累影响最大的是海拔高度,其次是降雨量、土壤有机质含量、土壤速效钾含量。从区域分析可以看出:农大的最低,闽清最高,且各不同区域间,除了邵武跟清流之间,其它不同区域间都存在着显著差异。总黄酮含量与4个立地因子之间的线性关系良好,回归方程为:Y=1.536+0.01X1+0.01X3-0.069X4+0.02X7 R2=0.826*。4、圆齿野鸦椿叶片采收月份的差异,从5月份开始,随着时间的推移,黄酮的含量在总体上呈现上升的趋势,在11月份的时候达到最高值,而后有下降的趋势。5、施肥对圆齿野鸦椿的干物质积累产生一定的影响,施用氮肥对枝条干物质积累的影响表现为N2>N3>N1>N0,且各不同处理之间的差异达到显著水平,对叶片干物质积累的影响表现为N2>N3>N1>N0,且达显著水平,表明施用氮肥有利于圆齿野鸦椿枝条与叶片干物质的积累,但过度施用氮肥反而会降低枝条跟叶片的干物质的积累。施用磷肥有利于圆齿野鸦椿枝条和叶片干物质的积累,但是过度的施用磷肥反而会降低物质的积累量,对枝条干物质积累的影响P2>P3>P1>P0、且达到显著水平,对叶片干物质积累的影响为P2>P1>P3>P0。钾肥对圆齿野鸦椿枝条干物质积累的影响为K2>K3>K1>K0,K0与K1之间的差异不明显,其余不同处理间的差异达显著水平,对叶片干物质积累的影响为K2>K1>K3>K0,且达显著水平,说明合理的施用钾肥有利于圆齿野鸦椿枝条和叶片的干物质积累,钾肥不足或者过量的施用钾肥会影响圆齿野鸦椿枝条和叶片干物质的积累。6、通过回归分析进一步拟合圆齿野鸦椿叶片黄酮产量与氮磷钾肥的效应方程,单独施用N、P、K肥时的推荐施肥量分别为0.05991Kg/株、0.248 Kg/株、0.287 Kg/株得到最高黄酮的最高产量分别为0.0323 Kg/株、0.0336 Kg/株、0.0349 Kg/株;氮磷交互作用推荐施肥量分别为0.8019 Kg/株和0.3635 Kg/株,得到最高产量为0.0325 Kg/株,氮钾交互作用推荐施肥量分别为0.5844 Kg/株和0.3122 Kg/株,最高产量为0.0327 Kg/株,磷钾交互作用推荐施肥量分别为0.2481 Kg/株和0.2866 Kg/株,最高产量为0.034 Kg/株;氮磷钾三因素交互作用推荐施肥量分别为 0.7276 Kg/株、0.4122 Kg/株、0.2326 Kg/株,最高产量为 0.0363 Kg/株。