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目的:通过查阅不孕症相关的中医文献,对女性妊娠的机理进行系统总结,根据中医文献中有关不孕症的病因试阐明和解释女性不孕症发病的根本原因。探讨从培调肾气法论治不孕症的理论基础,为针灸取穴治疗不孕症提供理论指导。实验采用控制性超排卵长方案以建立COH(控制性超排卵)小鼠模型,通过针刺“关元穴”、“中极穴”、“三阴交穴”,观察电针对COH模型小鼠妊娠率和平均着床位点数的影响及其对小鼠子宫内膜IGF-1信号转导的调控作用,使针刺更好的应用于辅助生殖技术中,提高胚胎着床率,改善妊娠结局,并为中医药和针灸治疗不孕症提供理论基础和实验依据。方法:1.理论探讨:系统查阅和整理与不孕症相关的文献,理清女性妊娠的机理,分析中医文献中有关不孕症的病因,试阐明不孕症的根本原因。探讨从培调肾气法论治不孕症的机理,并为针灸取穴提供理论基础。2.实验研究:选用SPF级昆明纯种性成熟的雌性小鼠120只和雄性小鼠90只,将雌性小鼠随机分为自然周期组和造模组,其中20只小鼠设为自然周期组,100只小鼠设为造模组,造模组应用控制性超排卵长方案以建立COH模型。造模成功后将造模组100只小鼠分为COH组、电针组、电针+BMS-536924组、电针+LY-294002组、电针+PD-98059组,每一组共20只,每个组又随机均分为供体鼠及受体鼠,每种鼠10只。实验前1周随机结扎45只雄性鼠,另外45只不做结扎处理,正常饲养。电针组、电针+BMS-536924组、电针+LY-294002组、电针+PD-98059组在绒促性激素(HCG)注射当日即行电针治疗,直至取材。注射HCG当天将各组供体鼠与正常雄性鼠进行合笼,并标注见阴道栓的日期,记为孕第一天,于孕第二日14时取2-细胞置于培养箱中培养;受体鼠与供体鼠同组同步,将雄性结扎鼠与受体鼠按1:1比例合笼,次晨检查小鼠阴道栓,逐一标记见栓日期,若见阴道栓则为假孕小鼠,即为受体鼠。胚胎培养约第68h后,将供体鼠的胚胎移植至本组同日见阴道栓的受体鼠(假孕小鼠)子宫内,胚胎移植时分别将igf-1r阻断剂、pi3k通路阻断剂、mapk通路阻断剂注射到电针+bms-536924组、电针+ly-294002组、电针+pd-98059组同日见阴栓的受体鼠宫腔内。观察coh模型小鼠妊娠率和平均胚胎着床位点数的变化;westernbolt法检测各组小鼠子宫内膜igf-1r蛋白表达水平;westernbolt法检测各组小鼠子宫内膜igf-1r、akt、erk1/2磷酸化水平的表达。结果:1.电针对coh模型小鼠妊娠率和平均胚胎着床位点数的影响:与自然周期组比较,coh组妊娠率明显降低(p<0.01);与coh组比较,电针组、电针+ly-294002组、电针+pd-98059组的妊娠率明显升高(p<0.01),而电针+bms-536924组与coh组比较妊娠率无明显改善,差异没有统计学意义(p>0.05);与电针组比较,电针+bms-536924组、电针+ly-294002组和电针+pd-98059组妊娠率都有所降低(p<0.01,p<0.05)。与自然周期组比较,coh组平均胚胎着床位点数明显降低(p<0.01);与coh组比较,电针组、电针+ly-294002组、电针+pd-98059组的平均胚胎着床位点数明显升高(p<0.01),而电针+bms-536924组与coh组比较没有统计学意义(p>0.05);与电针组比较,电针+bms-536924组平均胚胎着床位点数有所降低(p<0.01),而电针+ly-294002组和电针+pd-98059与电针组比较没有统计学意义(p>0.05)。2.电针对coh模型小鼠子宫内膜igf-1r蛋白表达的影响:与自然周期组比较,coh组小鼠子宫内膜igf-1r蛋白质的表达明显降低(p<0.01);与coh组比较,电针组、电针+bms-536924组、电针+ly-294002组和电针+pd-98059组的小鼠子宫内膜igf-1r蛋白质的表达明显升高(p<0.01);与电针组比较,电针+bms-536924组、电针+ly-294002组和电针+pd-98059组小鼠子宫内膜igf-1r蛋白质的表达都有降低(p<0.01)。3.电针对coh模型小鼠子宫内膜中igf-1r、akt、erk1/2磷酸化水平的影响:与自然周期组比较,COH组小鼠子宫内膜IGF-1R、AKT和ERK1/2的磷酸化水平明显降低(P<0.01);与COH组比较,电针组、电针+BMS-536924组、电针+LY-294002组和电针+PD-98059组的小鼠子宫内膜IGF-1R、AKT和ERK1/2的磷酸化水平明显升高(P<0.01);与电针组比较,电针+BMS-536924组、电针+LY-294002组和电针+PD-98059组小鼠子宫内膜IGF-1R、AKT和ERK1/2的磷酸化水平都有降低(P<0.01)。结论:1.电针针刺小鼠中极穴、关元穴、三阴交穴能提高COH模型小鼠的妊娠率和平均着床位点数。2.电针提高COH模型小鼠的妊娠率和平均着床位点数可能与改善小鼠子宫内膜IGF-1R的蛋白表达有关。3.与COH组比较,电针组、电针+BMS-536924组、电针+LY-294002组和电针+PD-98059组的小鼠子宫内膜IGF-1R、AKT和ERK1/2的磷酸化水平明显升高;与电针组比较,电针+BMS-536924组、电针+LY-294002组和电针+PD-98059组小鼠子宫内膜IGF-1R、AKT和ERK1/2的磷酸化水平都有降低,提示电针提高COH模型小鼠妊娠率和平均胚胎着床位点数可能是通过增加小鼠子宫内膜中IGF-1R的磷酸化表达水平从而激活PI3K/AKT和MAPK/ERK1/2信号转导的通路来实现的。4.通过培调肾气法可提高COH模型小鼠的妊娠率和平均着床位点数,改善胚胎着床从而提高临床妊娠率。