超声—离子液体处理对乳清蛋白特性和酶解产物活性的影响

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乳清蛋白在牛乳的总蛋白质中约占20%,具有营养价值高、易消化吸收、活性成分多等优点,是当前国际食品界中极具发展前景的功能因子和最热门的研究课题。本文以牛乳清蛋白为材料,采用红外光谱、拉曼光谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳和荧光光谱等方法研究了超声-离子液体处理对乳清蛋白理化性质的影响;通过酶解反应热力学、动力学等研究了超声-离子液体处理后乳清蛋白酶解特性的变化;并利用抗氧化活性、血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性和免疫活性试验,探讨超声-离子液体处理对乳清蛋白酶解产物生物活性的影响。研究结果表明,与未处理相比,超声-离子液体处理后乳清蛋白的巯基含量增加了46.8%,二硫键含量减少了29.6%;α-螺旋和β-转角含量分别降低了27.7%和62.9%,β-折叠和无规则卷曲含量分别提高了97.0%和46.2%;乳清蛋白的疏水性提高了68.3%;超声-离子液体处理引起了乳清蛋白二级结构明显变化,但对其一级结构没有影响。与未处理相比,超声-离子液体处理后乳清蛋白的活化能(Ea)、活化焓(ΔH)、活化熵(ΔS)和活化吉布斯自由能(ΔG)分别降低了39.1%、41.3%、39.9%和1.4%;酶解初速度提高了37.3%;建立了未处理乳清蛋白的酶解动力学方程为:DH=7.25ln[1+(18.45E0/S0-0.0105)t],超声-离子液体处理的乳清蛋白的酶解动力学方程为DH=7.40ln[1+(22.53E0/S0-0.0073)t],酶解动力学模型发生了改变,其酶解反应所需的临界酶浓度(e0)降低了43.1%;乳清蛋白酶解产物中≤5ku组分的含量显著提高(P<0.05),比未处理组提高了12.2%;热力学和酶解动力学试验结果均揭示出超声-离子液体处理促进了乳清蛋白酶解。与未处理相比,超声-离子液体处理后的乳清蛋白酶解产物DPPH自由基清除能力和Fe2+螯合能力分别提高了14.4%和28.4%,其还原力也得到了提高;超声-离子液体处理后,乳清蛋白酶解产物的体外ACE抑制活性比未处理的提高了57.2%;免疫活性也显著提高。本文研究揭示出超声-离子液体处理能够改变乳清蛋白的理化特性和酶解特性,能够促进乳清蛋白酶解和提高其酶解产物的抗氧化、ACE抑制活性和免疫活性。
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