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目的:研究观察雷帕霉素(RAPA)对转化生长因子-β2(TGF-β2)诱导的人晶状体上皮细胞(HLECs)系SRA01/04增殖、迁移和细胞周期的改变及其上皮间质转分化(EMT)生物学行为的影响,为后发性白内障的防治提供理论依据。 方法:将传代的HLECs系SRA01/04进行体外培养,用10ng/mlTGF-β2诱导后,加10、20、40、80、160ng/ml浓度的RAPA培养液培养12h、24h、48h,对照组只加细胞。CCK-8法检测各组SRA01/04的吸光度(A190)值以评估细胞的增生情况。选取TGF-β2+80ng/mlRAPA作用于HLECs12h、24h、48h,划痕法观察各时间点HLEC.s移行情况;流式细胞仪检测各时间点细胞周期的改变。选取TGF-β2+80ng/mlRAPA作用于HLECs48h,细胞免疫组化分析HLECs EMT的标志物蛋白,a平滑肌肌动蛋(a-SMA)和上皮性钙粘附蛋白(E-cad)表达的变化。 结果:CCK-8法检测结果显示,RAPA对细胞增殖的抑制作用呈剂量和时间依赖性,随着RAPA浓度和时间的增加,HLECs增生值降低,以TGF-β2+80ng/mlRAPA为最佳浓度,(P<0.05)差异具有统计学意义。划痕法结果显示,TGF-β2+80ng/ml RAPA作用HLECs12h、24h、48h随着作用时间的延长,对照组和TGF-β2组细胞划痕面见大量细胞覆盖移行能力强;RAPA组和RAPA+TGF-β2组划痕面少量细胞覆盖移行能力明显减弱。流式细胞仪分析显示,80ng/mlRAPA作用48h有明显差异,G0/G1期细胞较对照组增多,S期细胞较对照组减少(P<0.05)差异有统计学意义。细胞免疫组化结果表明,TGF-β2+80ng/mlRAPA作用于HLECs48h,对照组中E-cad和a-SMA表达少;RAPA+TGF-β2组中E-cad表达逐渐增多,a-SMA表达逐渐减少。((P)<0.05)差异有统计学意义。 结论:RAPA对TGF-β2诱导的HLECs增殖、迁移具有抑制作用,使HLECs部分阻滞于细胞周期的S期,其作用呈剂量和时间依赖性,同时,RAPA还具有抑制TGF-β2诱导的HLECs上皮间质转化的作用,对后发性白内障的防治具有一定的应用前景。