原发性胆囊癌的发病率近年来呈上升趋势，由于其缺乏特异的临床表现，早期诊断困难，绝大多数患者发现时已为中晚期，失去了手术根治的机会，预后极差，总的5年牛存字小于5％。胆囊癌对化疗、放疗均不敏感，手术切除仍然是目前治愈胆囊癌的主要手段，多数学者认为对胆囊癌高危人群施行“预防性胆囊切除术”，是改善胆囊癌恶劣预后的重要措施。鉴于目前胆囊切除术仍有一定的并发症率，且有人担心胆囊切除术后结肠癌发生率会增加，因此，如何确定“预防性胆囊切除术”的合适人群，成为临床上亟待解决的问题。 萎缩性胆囊炎是胆囊结石症的一个特殊类型，临床上并不少见，表现为胆囊萎缩，失去原有功能，胆囊壁增生变厚，正常组织被纤维结缔组织取代，可能是胆囊癌的癌前病变，但需要进一步的细胞学乃至分子生物学水平研究的验证。 PCNA(proliferative cell nuclear antigen)是真核细胞合成DNA所必需的一种核蛋白，在G，期晚期和整个S期表达增加，对DNA复制的调节起重要作用，其阳性表达率与细胞增殖水平密切相关。单克隆抗体Ki-67标记一种核内基质蛋白(ki-67抗原)，该蛋白出现于细胞周期S、G：和M期，Ki-67表达增强，提示M期细胞增多，细胞的增殖活跃。PCNA和Ki-67在多种恶性肿瘤中有过度表达，两者的表达在胆囊癌和胆囊良 浙江大学硕士学位论文 性病变组之间亦存在显著差异。 本文拟采用PCNA和i47对萎缩性胆囊炎的细胞增殖活性进行研究，探讨其癌变 倾向及其与患者年龄、病程长短、胆囊壁厚度及结石大小等临床参数之间的关系，旨在 为临床上合理判定“预防性胆囊切除术”的时机和指证提供理论依据。 t 材料和方法，1．病例选择 收集浙江大学医学院附属邵逸夫医院普外科 200年 1月至 2002年 1月间，对因“萎 缩性胆囊炎”行胆囊切除术的病例72例。另选同期慢性单纯性胆囊炎和原发性胆囊癌 各10例作对照组。 2 免疫组化染色 所有胆囊标本经10O／O福尔马林溶液固定，石蜡包埋，4mp连续切片。采用免疫组化 En Wsion二步法检测 PCNA、Ki．67的表达。操作步骤按试剂说明书执行，设立阳性及 阴性对照。PCNA和i－67均以细胞核、或胞核伴有胞浆出现棕黄色作为阳性细胞，分 别对PCNA和i．67的表达作定量和定性分析。 3．数据处理 PCNA阳性指数的比较采用！检验，hi－67阳性率的比较采用X检验。 结果和讨论 l、萎缩性胆囊炎组 PCNA阳性指数为 4703％土 18．15％，明显高于慢性单纯性胆囊炎 组32．90％士了11％（p＜0．05）。原发性胆囊癌组PCN人阳性指数为go．10％士5．】3％，与萎 缩性胆囊炎组相比．差异有显著性（p＜00卜。萎缩性胆囊炎组h－67阳性表达率为％9％ （41／72），慢性单纯性胆囊炎组的h．67阳牲率为 10o（l／10），两者差异具有显著性 二 浙江大学硕士学位论文 （p＜0．01）。10例原发性胆囊癌i－67表达均为阳性，与萎缩性胆囊炎组相比，差异有 显著性（p＜0．of）。说明萎缩性胆囊炎细胞增殖活性较一般慢性胆囊炎明显增强，应警 惕其癌变倾向。 2．萎缩性胆囊炎组病例中PCNA的表达与患者年龄、病程长短、胆囊壁厚度及结石直 径4个临床参数之间具有相关性。年龄350岁者PCNA阳性指数5408％上14，99O／，高 于年龄t50岁者 39、15％土 18．33％，prto刀1；病史35年者 PCNA阳性指数 5556％上 15刀7％，高于病史rts年者34．38％土14．74％，prt001；胆囊壁厚度3040cm者PCNA 阳性指数53＊5％士1319％，高于胆囊壁厚度＜040一者24．94％上14刀0％，p＜001： 胆囊结石直径31刀。m者PCNA阳件指数5452％上15．34％，高于结石直径＜10cm者 3653％士16刀7九，Pwt001。而不同性别间的PCNA表达无显著性差异，男性和女性思 丢的PCNA阳性指数分别为4300O／土！7 18％和4858％士1844％，p＞005。KI－67的表 达阳性率也与患者年龄、病史长短、胆囊壁厚度及结石亘径4个临床参数之间呈相关性。 年龄）50岁组h．67阳性率为兀．3％（29门8），年龄＜so岁组为353％（u旧4），两者 差异有显著性（p＜0．of）；病史35年组i－67阳性率为sl?