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目的:研究七氟烷对新生大鼠海马组织端粒酶逆转录酶(TERT)的影响,探讨七氟烷导致神经细胞凋亡与TERT表达的关系。 方法:出生后7天的SD大鼠40只随机分为对照组(C组)20只、七氟烷吸入组(S组)20只。23℃室温下,将对照组大鼠(C组)放入特制有机玻璃箱持续吸入纯氧,氧流量2L/min。实验组(S组)放入与对照组相同大小质地的有机玻璃箱予2.3%七氟烷吸入(氧流量2L/min),箱底平铺钠石灰吸收呼出的二氧化碳。实验过程中持续观察新生大鼠的皮肤色泽、呼吸频率及呼吸动度、氧饱和度仪测量新生大鼠的脉搏氧饱和度和心率。持续监测箱内七氟烷MAC浓度和出气端二氧化碳浓度。实验过程中凡出现大鼠肤色发绀、呼吸微弱、脉搏氧饱和度低于96%、心率低于100次/分不计入结果。六小时后,记录所有大鼠生命体征,选取合格(未出现发绀,脉搏氧饱和度96%以上,心率100次/分以上)的大鼠。最终,实验组16只合格,对照组20只均合格。待新生大鼠苏醒(大鼠自由活动,逃避反射恢复)后1小时,活体1分钟内取出大鼠海马组织。用苏木精-伊红染色法(HE染色)及原位末端脱氧核糖转移酶标记法(TUNEL)观察海马神经细胞凋亡情况,用免疫组织化学(IHC)以及实时荧光聚合酶链反应(Real-time PCR)分析海马组织端粒酶逆转录酶蛋白质与mRNA表达。 结果:1.HE染色显示:对照组(C组)海马细胞排列紧密,细胞核圆而大,核仁清晰胞浆丰富,着色均匀为蓝紫色,细胞核为圆形或椭圆形,可见深染的核仁。而七氟烷吸入组(S组)海马神经细胞排列紊乱,细胞形态不规则,细胞体积变小,可见核固缩现象,伴有空泡细胞形成。2. TUNEL显示:与对照组(C组)神经元凋亡数量(1.324±0.032)相比,七氟烷组(S组)海马神经元凋亡数量(11.408±2.357)显著提高,差异有统计学意义(P<0.05)。3.免疫组化结果显示:与对照组(C组)TERT表达情况相比,七氟烷组(S组)TERT强阳性、阳性和弱阳性表达均较低,且差别有统计学意义(P<0.05)。4. Real-Time PCR结果显示:与对照组(C组)2-ΔΔCt相比,七氟烷组(S组)2-ΔΔCt的值是对照组的1/14.281,较对照组明显降低。 结论:七氟烷可能通过下调端粒酶逆转录酶表达促使神经细胞凋亡。