【摘 要】
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背景:肾脏缺血再灌注损伤（IRI）是指肾脏在缺血以及随后恢复灌注时产生的损伤,在肾移植、肾部分切除手术、严重创伤、失血性休克等疾病中普遍存在。肾脏IRI不仅可引起急性肾损伤（AKI）,同时也是慢性肾脏病（CKD）的一个重要原因,最终可导致终末期肾衰竭的发生。目前尚无理想的治疗方法。脂肪基质血管成分（ad-SVF）是从脂肪组织分离的包含间充质干细胞（MSC）、内皮祖细胞（EPC）的新型干细胞源。我们
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背景:肾脏缺血再灌注损伤（IRI）是指肾脏在缺血以及随后恢复灌注时产生的损伤,在肾移植、肾部分切除手术、严重创伤、失血性休克等疾病中普遍存在。肾脏IRI不仅可引起急性肾损伤（AKI）,同时也是慢性肾脏病（CKD）的一个重要原因,最终可导致终末期肾衰竭的发生。目前尚无理想的治疗方法。脂肪基质血管成分（ad-SVF）是从脂肪组织分离的包含间充质干细胞（MSC）、内皮祖细胞（EPC）的新型干细胞源。我们的前期研究证实,ad-SVF可减轻急性肾脏IRI的肾小管损伤,改善肾功能。但是ad-SVF修复肾损伤的机制尚不明确,外泌体在组织损伤修复中显示出了很好的应用潜力,但目前未见ad-SVF源外泌体修复肾脏IRI的有关报道。我们通过建立大鼠肾IRI模型,采用ad-SVF源外泌体输注移植的方法,探讨ad-SVF来源的外泌体对大鼠肾IRI的作用及机制。目的:观察ad-SVF源外泌体对肾IRI的影响,探讨ad-SVF源外泌体对肾脏IRI的修复机制。材料与方法:48只SD大鼠行右肾切除,建立孤立肾动物模型,将上述大鼠用随机数表法分为4组,即假手术组（Sham组）、缺血再灌注损伤组（IRI组）、ad-SVF组（SVF组）和ad-SVF源外泌体组（Exos组）。取大鼠附睾周围脂肪组织,制备SVF。建立肾脏缺血再灌注损伤模型并进行以下处理:假手术组（sham组）:建立左侧孤立肾动物模型,暴露左侧肾脏后不做处理关腹。ad-SVF组（SVF）:左肾开放血流同时于肾包膜下行SVF注射移植。ad-SVF源外泌体组（Exos组）:左肾开放血流同时行肾包膜下ad-SVF源外泌体注射移植。肾缺血再灌注损伤组（IRI组）:大鼠肾缺血再灌注损伤模型。术后1d、3d、7d分别收集静脉血标本,检测血清肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）水平;取肾脏组织标本行H＆E、免疫组化检测,评价肾小管损伤程度,细胞增殖,肾小管上皮损伤修复及管周毛细血管新生特征。结果:电镜下观察到ad-SVF源性外泌体直径主要为40-100nm。Western blot检测发现ad-SVF源性外泌体可表达CD9和CD63标志蛋白;缺血再灌注损伤动物术后 1d、3d、7d,Exo 组 Scr 分别为 65.43±4.65、84.23±8.74、64.22±5.16μmol/L,SVF 组 Scr 分别为 61.20±3.38、73.72±8.30、55.61±6.56μmol/L,两组均明显低于 IRI 组 134.77±4.54、165.4±9.89、121±8.74μmol/L,差异有统计学意义（P＜0.05）;Exo 组 BUN 分别为 14.98±3.33、19.24±2.35、11.89±1.42mmol/L,SVF 组 BUN分别为 13.35±1.96、14.17±1.45、10.65±2.48mmol/L,两组均明显低于 IRI 组24.47±1.17、28.31±4.13、19.0±3.38 mmol/L,差异具有统计学意义（P＜0.05）;术后 1d、3d、7d,Exo 组肾小管损伤评分为 1.9±0.2、2.4±0.6、2.2±0.5,SVF 组肾小管损伤评分为 1.8±0.5、2.1±0.5、2.0±0.3,亦低于 IRI 组 2.6±0.5、3.9±0.6、3.2±0.4,差异有统计学意义（P＜0.05）;术后3d,Exo组与SVF组Ki67阳性细胞数分别为86.7±6.5、92.2±5.3,高于IRI组27.0±5.8,差异有统计学意义（P＜0.05）;Exo组与SVF组E-cadherin阳性细胞面积百分比分别为9.8±4.9、10.5±4.3,高于IRI组6.3±2.7,差异有统计学意义（P＜0.05）;Exo组与SVF组CD34阳性管周毛细血管数分别为255.8±30.4、215.7±21.5,高于IRI组、98.6±15.2,差异有统计学意义（P＜0.05）,与Sham组231.5±23.1相比差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:ad-SVF源外泌体可促进大鼠缺血再灌注损伤肾组织结构和功能恢复,可为急性肾脏缺血再灌注损伤的防治提供一种新思路。
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