肝癌是人类一直以来所面临的一个重要的健康问题,它是五大常见癌症之一同时也是三大高致死率的癌症之一。肝癌的诱发因素很多,其中乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV),丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)等肝炎病毒的感染是引发肝癌发生的一个非常重要的因素。目前,全球约有超过20亿的人感染或感染过HBV,在这些人中大约有2.4亿是HBV慢性感染者。在全球范围内,每年大约有75万人死于HBV感染,其中有65万人死于HBV慢性感染所引起的肝硬化和肝癌,其他约10万人死于HBV急性感染。目前,科学界一致认为HBV感染之所以难以清除的原因在于难以清除的病毒的共价闭合环状DNA (covalently closed circular DNA, cccDNA)。时至今日,关于HBV的相关研究已经非常之多,但是HBV具体的致病机理依然不是很清楚,因此,有关HBV的致病机理还存在很大的研究空间。在生理状态下,病毒感染宿主细胞后,一方面病毒会利用自身组分或者激活部分宿主细胞因子,以抑制宿主细胞的免疫系统,从而促进病毒自身的复制。另一方面,宿主也会针对病毒的感染做出相应的免疫反应,最终清除病毒。而最终的病理状态取决于病毒与宿主免疫系统斗争的结果。先天免疫系统(innate immune system)是人体抵御病原体入侵的广谱性的、非特异性的有效措施。其中模式识别受体(pattern-recognition receptors, PRRs)是负责识别病原体入侵以及启动宿主免疫的最为关键的一类受体蛋白。Toll样受体(Toll-like receptors, TLRs)是最早被发现的一类模式识别受体,其与配体相结合后,会招募接头蛋白进一步激活下游信号通路且最终激活NF-κB和IRF3/7,激活后NF-κB和IRF3/7入核后可直接调控干扰素(interferon, IFN)在转录水平的表达,干扰素表达后可调控多种干扰素刺激因子(interferon stimulated genes, ISGs)的表达,这些因子可直接或间接参与抗病毒过程。Sox4 (Sex-determining region Y box 4)是SoxC家族成员之一,其分子量大小为47 KDa,主要作为转录因子行使其功能,Sox4蛋白N端含有一个Sry相关的HMG box DNA结合结构域,能高效、特异性地结合靶基因启动子序列为AACAAAG的DNA结构域；其C端含有一个反式激活结构域(TAD),激活下游基因的表达。主要在胚胎发育,器官形成,细胞生长以及肿瘤发生、迁移中发挥重要的功能。目前,Sox4作为致癌因子与胃癌、前列腺癌、白血病、黑色素瘤、结肠直肠癌、胆囊癌、乳腺癌等多种癌症的发生、发展有着紧密的联系。有研究表示,Sox4可以作为肿瘤标志物应用在临床诊断肿瘤的发生中。近期也有研究发现Sox4可以调控T辅助性淋巴细胞的分化以及抑制其介导的炎症,然而关于Sox4与病毒感染以及先天免疫方面的研究到目前为止没有任何报道。本论文中,我们首次证明了HBV促进Sox4表达的机制。转录水平上,HBV通过MAPK信号通路激活转录因子YY1的表达,激活后的YY1通过直接结合Sox4的启动子促进Sox4的表达；转录后水平上,HBV通过甲基化作用抑制miR-335,miR-129-2, miR-203的表达,从而解除3种miRNAs对Sox4 mRNA的抑制作用,已到达促进Sox4的表达；蛋白水平上,HBV表面抗原蛋白(HBs)通过与Sox4相互作用抑制蛋白酶体介导的Sox4的泛素化降解,从而促进Sox4的稳定性。反过来,我们也发现Sox4在HBV的复制中起着很重要的作用。Sox4作为转录因子可以直接结合在目的基因启动子上序列为AACAAAG的DNA小沟上调控基因的表达。通过软件分析,在HBV的基因组上也存在一个Sox4的结合位点。进一步,我们证实了Sox4可以结合在预期的位点以及Sox4可以促进HBV病毒在肝癌细胞中的复制,同时也证明了Sox4在HBV基因组的特定序列上的结合是Sox4促进HBV病毒复制的关键因素。紧接着,我们发现VSV, IAV, HCV和EV71等病毒也可以促进Sox4的表达,在IAV感染的临床样本中Sox4的表达明显高于正常人且IAV的病毒滴度与Sox4的表达水平成正向相关性。再者,我们也证明了Sox4也可以促进VSV, IAV, HCV和EV71等病毒在细胞系水平上的复制。进一步的探究中我们发现Sox4之所以能同时促进多种病毒复制的原因在于Sox4抑制了干扰素(IFN)及干扰素刺激因子(ISGs)的表达。干扰素表达的调控主要发生在转录水平上,NF-κB和IRFs是调控干扰素表达的重要转录因子。研究中,我们发现Sox4通过其转录激活结构域(TAD)与IKK复合体相互作用,进而抑制IKK的磷酸化及下游NF-κB的激活；其次,我们证实了Sox4可以抑制p65, p50, IRF3和IRF7四种调控干扰素表达的因子,而这种抑制作用是缘于Sox4对p65, p50, IRF3和IRF7蛋白质的降解作用,通过实验,我们也证实了Sox4可以促进p65,p50,IRF3和IRF7的蛋白酶体介导的泛素化降解。最后,我们还发现Sox4可以直接结合在TLRs的启动子上抑制TLRs的表达,进一步导致Sox4对整个MyD88依赖和非依赖型信号通路的抑制。论文中我们通过研究HBV与Sox4的表达关系,首次揭示了病毒感染促进Sox4表达的机制,将病毒感染与Sox4的表达联系起来。同时,通过Sox4促进HBV的复制证明了Sox4在HBV病毒复制中的重要作用。更为重要的是,通过Sox4促进多种病毒复制的机制研究,我们首次证明了Sox4抑制干扰素表达及TLR信号通路的机制,这一发现首次将Sox4与先天免疫联系起来,开辟了Sox4功能研究的新方向。