基于功能核酸和聚集诱导荧光的新型荧光探针体系的研究

来源 :清华大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huimiandiadia
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
荧光分子探针具有简单直观、灵敏度高、选择性好、有良好的时间和空间分辨能力等优点,已成为包括离子、小分子、生物大分子、病原体等各种与环境、生物、医学相关的分析物检测的重要手段。理想的荧光分子探针需具备高特异性的识别单元以及具有优秀荧光性能的信号响应单元,即荧光团。因此,本文结合功能核酸和聚集诱导荧光分子的优点,构建了新型荧光探针体系。首先,本文设计开发了以功能核酸作为识别单元的新型非共价标记催化分子信标荧光分析方法。该方法不仅具备催化分子信标法灵敏度高的优点,同时还具备含有缺碱基位点的非共价标记功能核酸方法操作简便,成本较低廉,对功能核酸的活性干扰较小等优点。通过8-17核酸酶和适体酶,该方法分别实现了对铅离子和有机小分子腺苷的高选择性,高灵敏度的分析检测:对水溶液中铅离子响应的线性范围为0-2.0μM,检测限为3.8nM;对水溶液中有机小分子腺苷的检测限为1.4μM。同时,该方法能够应用于检测生物样品中的铅离子和腺苷小分子。其次,本文以聚集诱导荧光分子作为响应单元,构建了两种基于聚集诱导荧光的新型荧光探针:1)比率型pH荧光探针,4-羧基-苯胺-5-氯-水杨醛席夫碱。利用其分子内羧基和羟基能够发生去质子化作用,使得溶液pH值在5.0-7.0变化时,体系在516nm和559nm处荧光强度的比值(I516/I559)随之明显变化,成功的实现了对细胞内pH值变化的原位荧光成像分析。2)铜离子荧光探针,双(2-吡啶基亚甲基)对苯二甲酸二肼。利用在水溶液中探针与铜离子形成2:1的络合物导致荧光淬灭的原理,实现了水溶液中铜离子的分析检测。并且,基于该探针的聚集诱导荧光性质制备了铜离子检测试纸,检测限可达4.2μM。上述两种探针均具有合成简单、选择性好、斯托克斯位移大等优点。第三,本文采用溶胶凝胶方法合成了包覆聚集诱导荧光染料的氧化硅纳米粒子。通过控制荧光染料的包覆量和反应条件,可以调控该荧光纳米粒子的量子产率和粒径。进一步将功能核酸对分析物高特异性、高结合力的识别性能与聚集诱导荧光分子高量子产率、大斯托克斯位移等优越的荧光性能相结合,成功地制备了NCL-适配体修饰的包覆聚集诱导荧光染料的氧化硅纳米探针。初步实验结果表明,该荧光纳米探针能够对核仁蛋白过度表达的人乳腺癌细胞系MCF-7细胞进行荧光标记,在癌细胞的识别和荧光标记领域具有潜在的应用价值。
其他文献
飞机板块诞生至今,不过短短五年时间。如果将这五年放在世界航空巨擘发展壮大的时间轴上,它显然渺小的不足称道。但是对于中国航空工业发展而言,这“黄金”五年无疑具有至关重要
报纸
灯盏花是云南特色的野生天然药用植物。灯盏花具有活血化瘀、舒筋、止痛、改善微循环的特殊功效,市场前景广阔,有较高的经济价值。灯盏花经提取后的总黄酮为灯盏花素,是灯盏
由于我国是人口大国,淡水量的需求非常的巨大,有限的水资源加之严重的污染,对于人们的基本生活用水造成了严重威胁,纵然我国已经进行了长期的水质环境的监测和治理,但是依然
近些年来,我国出版业取得了可喜的成就,但是目前的编辑出版教育存在很多不足。编辑出版专业本科培养模式不成熟;编辑出版学学科归属不清;课程设置专业特色不突出;专业实践教
道德观念是指导个体行为的准则,违法青少年的道德观念及其再教育问题值得关注。采用道德品质词汇库和道德品质词汇重要性选择问卷,对三组青少年进行调查,三组青少年所认同的
目的:探究对精神分裂症患者实施心理护理对康复效果的影响。方法:选取68例精神分裂患者,并随机分为观察组和对照组,每组各34例。对照组患者实施常规精神药物护理,观察组患者在
课堂讨论法是学生自主、合作学习的一种常用方法,对发挥教师的主导作用,凸显学生的主体地位,彰显学生个性起到重要作用。要组织好课堂讨论,优化英语课堂教学,必须注意精心选
目的了解上海市新一轮家庭医生绩效考核工作的实施情况,探讨绩效考核对家庭医生激励作用的影响因素。方法采用分层整群随机抽样调查方法,从上海市65家试点社区卫生服务中心中
目的:观察加味四君子汤治疗肌萎缩侧索硬化症(ALS)的疗效和安全性。方法:将48例ALS患者随机分为治疗组(n=24)和对照组(n=24),在常规药物治疗基础上治疗组给予加味四君子汤口
<正> 气候和气候变化的研究一直是世界气象组织(WMO)的基本任务,在60年代末和70年代初世界气象组织就已经特别关注世界气候和大气成份的变化——现在作为一个课题更增加了它