GCNT3表达在非小细胞肺癌中的临床意义

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目的:肺癌发病率高、死亡率高、预后差,严重威胁着人类的健康,在肺癌中,非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)约占所有肺癌组织学类型的80%-85%。目前,临床上可用于判断肺癌患者的预后情况的标志物很少,因此寻找有效评估肺癌预后的生物标志物的意义深远。葡萄糖胺基转移酶3(glycosyltransferase enzyme 3,GCNT3)也被称为C2GNT2、C2/4GnT或GNTM,是β-1,6-N-乙酰葡糖胺基转移酶家族中的成员,在聚糖合成中起关键作用,目前有少量研究报道GCNT3的表达异常与肿瘤的发生密切相关。我们课题组前期通过表达谱芯片筛选到GCNT3在NSCLC患者组织中高表达。本文旨在研究GCNT3在非小细胞肺癌中的表达和功能意义,为NSCLC提供潜在预后标志物和治疗新靶点。方法:收集NSCLC患者的肿瘤组织标本评估GCNT3的表达水平,探讨GCNT3表达水平与NSCLC患者临床病理特征、总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)的关系;并进一步探究GCNT3的表达对细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。1.应用实时定量反转录链式反应(qRT-PCR)检测GCNT3在NSCLC患者肿瘤组织及对应正常组织中mRNA的表达情况;应用蛋白质印记技术(Western blot,WB)检测GCNT3在NSCLC患者肿瘤组织及对应正常组织中蛋白质的表达情况;2.收集164例NSCLC患者的肿瘤组织石蜡标本,通过免疫组织化学技术(Immunohistochemistry,IHC)评估样本中GCNT3的表达水平,应用χ~2检验分析比较GCNT3表达与NSCLC患者临床病理学特征之间的相关性。使用Kaplan-Meier方法绘生存曲线,并采用对数秩检验进行差异显著性分析,探究GCNT3表达与NSCLC患者OS及PFS的关系;单因素和多因素cox比例风险回归分析用于生存分析;3.构建抑制GCNT3表达的NSCLC细胞株A549,通过细胞增殖实验、划痕实验和Transwell实验研究GCNT3对NSCLC细胞增殖能力和迁移能力的影响。结果:1.GCNT3在NSCLC肿瘤组织和正常组织中的表达存有差异,qRT-PCR结果和蛋白质印记结果显示GCNT3在NSCLC肿瘤组织中的RNA表达水平和蛋白表达水平明显高于正常组织。2.免疫组化结果显示GCNT3表达水平与NSCLC患者的性别、吸烟史、组织分型和病理分期相关;Kaplan-Meier分析显示GCNT3阳性表达的NSCLC患者OS和PFS均差于GCNT3低表达患者(P<0.05)。此外,多因素Cox比例风险回归模型分析显示,GCNT3表达是NSCLC患者的独立预后因素(P<0.05)。3.细胞增殖实验显示抑制GCNT3表达后A549细胞增殖能力减弱;细胞划痕实验证实抑制GCNT3表达后A549细胞的迁移能力显著减弱;Transwell细胞侵袭实验显示,抑制GCNT3表达后A549细胞的侵袭能力减弱。GCNT3可促进A549细胞的增殖和迁移。结论:GCNT3在NSCLC肿瘤组织中高表达,GCNT3阳性表达的NSCLC患者OS和PFS较差,GCNT3表达水平是影响NSCLC患者预后的独立因素。GCNT3能够促进NSCLC细胞的增殖和迁移。GCNT3有望成为评估NSCLC患者预后的潜在生物标志物。
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