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草苁蓉(Boschniakia rossica(Cham.et Schlecht.)Fedtsch.)为列当科草苁蓉属植物。草苁蓉是一种民间用药,主要用于治疗肾虚阳痿、腰关节冷痛、便秘等。草苁蓉具有多种生物活性如抗衰老、抗肿瘤、抗炎、免疫系统调节、抗肝纤维化、保肝作用和提高记忆力等。因此本论文以草苁蓉为研究对象,通过制备液相色谱对其中主要成分进行分离提取,在此基础上建立HPLC发对其中两种主要成分进行定量分析;探讨了草苁蓉提取物对对氢化可的松诱导的肾阳虚小鼠模型的影响。研究结果表明:
1.采用制备液相分离技术对草苁蓉中的主要活性成分进行制备,并对分离出的化合物进行13C谱和IH谱测定,最终确定分离化合物为草苁蓉纳拉苷和草苁蓉苷B。
2.开发建立了HPLC同时检测分析草苁蓉中草苁蓉纳拉苷和草苁蓉苷B的方法:
色谱柱Klimail100-5C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.05%甲酸水(B);流速:1mL/min;柱温:30℃;检测波长:260nm;进样量:20μL:梯度洗脱条件:0-12min,15%(A);12-30min,15-20%(A);30-40min,20-25%(A);40-45min,25-30%(A);45-60min,30-100%(A)。结果表明方法灵敏、准确、稳定,为草苁蓉中草苁蓉纳拉苷和草苁蓉苷B的定量提供了方法。
3.本研究通过大剂量腹腔注射氢化可的松诱导肾阳虚证小鼠动物模型。以草苁蓉提取物高、中、低剂量和金匮肾气丸口服灌胃对比他们治疗肾阳虚证的效果:
以小鼠血清中超氧化歧化酶、丙二醛含量为指标,考察小鼠肾阳虚治疗过程中氧自由基反应情况;测定小鼠血清中睾酮、卵泡刺激素、cAMP和cGMP含量,考察动物的性激素变化;测定血清中ActR2A和BMP-5含量,检查肾阳虚小鼠骨骼变化。结果表明,金匮肾气丸、草苁蓉高剂量组能明显使肾阳虚证小鼠血清中超氧化歧化酶活力增强、丙二醛含量降低、血清中睾酮、cAMP明显升高,cGMP含量降低,ActR2A和BMP-5含量升高,肾阳虚证明显好转。
由以上结果可知,本论文完成了对草苁蓉中主要成分的分离提取;开发并建立了HPLC同时检测分析草苁蓉中的两种主要化合物(草苁蓉纳拉苷和草苁蓉苷B);分析了草苁蓉提取物对氢化可的松致肾阳虚证小鼠的治疗效果。本研究为草苁蓉的开发和利用提供了理论依据和科学支持。
1.采用制备液相分离技术对草苁蓉中的主要活性成分进行制备,并对分离出的化合物进行13C谱和IH谱测定,最终确定分离化合物为草苁蓉纳拉苷和草苁蓉苷B。
2.开发建立了HPLC同时检测分析草苁蓉中草苁蓉纳拉苷和草苁蓉苷B的方法:
色谱柱Klimail100-5C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.05%甲酸水(B);流速:1mL/min;柱温:30℃;检测波长:260nm;进样量:20μL:梯度洗脱条件:0-12min,15%(A);12-30min,15-20%(A);30-40min,20-25%(A);40-45min,25-30%(A);45-60min,30-100%(A)。结果表明方法灵敏、准确、稳定,为草苁蓉中草苁蓉纳拉苷和草苁蓉苷B的定量提供了方法。
3.本研究通过大剂量腹腔注射氢化可的松诱导肾阳虚证小鼠动物模型。以草苁蓉提取物高、中、低剂量和金匮肾气丸口服灌胃对比他们治疗肾阳虚证的效果:
以小鼠血清中超氧化歧化酶、丙二醛含量为指标,考察小鼠肾阳虚治疗过程中氧自由基反应情况;测定小鼠血清中睾酮、卵泡刺激素、cAMP和cGMP含量,考察动物的性激素变化;测定血清中ActR2A和BMP-5含量,检查肾阳虚小鼠骨骼变化。结果表明,金匮肾气丸、草苁蓉高剂量组能明显使肾阳虚证小鼠血清中超氧化歧化酶活力增强、丙二醛含量降低、血清中睾酮、cAMP明显升高,cGMP含量降低,ActR2A和BMP-5含量升高,肾阳虚证明显好转。
由以上结果可知,本论文完成了对草苁蓉中主要成分的分离提取;开发并建立了HPLC同时检测分析草苁蓉中的两种主要化合物(草苁蓉纳拉苷和草苁蓉苷B);分析了草苁蓉提取物对氢化可的松致肾阳虚证小鼠的治疗效果。本研究为草苁蓉的开发和利用提供了理论依据和科学支持。