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研究背景急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)是由急性冠脉阻塞引起的一种高致残致死率的急性心肌缺血性坏死。尽早恢复冠脉血流是减少心梗面积改善心功能降低死亡率的最主要方法。但是再灌注本身诱发的心肌损伤,即心肌缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion,I/R)却成为制约冠心病疗效的瓶颈。心肌缺血再灌注损伤是一复杂现象,多种引起不同后果的因素参与其中。目前认为自噬(autophagy)与之相关,调控自噬可能成为新的治疗方法。线粒体自噬是在线粒体进行的一种特异性自噬,选择性清除受损线粒体以避免细胞死亡。PINK1/Parkin通路是哺乳动物细胞的特有线粒体自噬通路。PINK1/Parkin招募到膜电位受损线粒体上通过自噬体清除之。对维持由缺氧引起细胞稳态失衡是十分有益的。Dexpramipexole(DPX)是一种氨基噻唑衍生物。容易进入线粒体,可促进氧自由基和氮自由基失活,稳定线粒体膜。提高线粒体的产能效率,改善线粒体功能。因此,我们推论:心肌缺血再灌注过程中,通过DPX适度上调线粒体自噬,可能具有心肌保护作用。目的本课题拟通过构建小鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤模型及新生乳鼠原代心肌细胞缺氧复氧(H/R)模型研究DPX对缺血再灌注后心肌的保护作用及其作用机制,详细认知DPX的治疗作用,为心肌缺血再灌注损伤的治疗提供新的治疗方法。方法与结果采用新生1-2天SD乳鼠分离培养原代心肌细胞,通过细胞在充满N2的缺氧盒及缺氧液中缺氧培养3小时,后复氧3小时来构建心肌细胞H/R模型。研究示:DPX没有心肌细胞毒性;心肌细胞H/R过程中PINK1水平下降:DPX预处理上调PINK1 水平,MTT示DPX预处理改善心肌细胞H/R损伤后的存活率;LDH、TUNEL、Caspase-3示DPX预处理减轻H/R导致的细胞损伤。采用野生型雄性C57BL/6小鼠(体重20-25g),通过结扎心脏冠状动脉左前降支45分钟后松解结扎线24小时,构建小鼠心肌I/R损伤模型。研究结果示:DPX预处理减少I/R损伤后心肌梗死面积,改善心脏功能,减少心肌坏死,降低血清CK、LDH、cTnI的水平。进一步研究DPX的作用机制发现:DPX预处理改善H/R后心肌细胞线粒体功能,上调I/R自噬,上调H/R线粒体自噬,PINK1参与了 DPX对H/R损伤心肌的保护,DPX激活Parkin转运至受损线粒体,DPX激活H/R心肌PIINK1和 Parkin,但这一效果可被 PINK1 knockdow 和 Parkin knockdow 反转。结论1.DPX预处理缓解心肌细胞H/R损伤;2.DPX预处理减轻心肌I/R损伤;3.DPX减轻心肌缺血再灌注损伤可能是通过PINK1/Parkin通路上调线粒体自噬机制实现的。