电针联合骨髓间充质干细胞治疗化疗型大鼠卵巢早衰的疗效研究

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Manjay
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目的:观察电针联合大鼠骨髓间充质干细胞对大鼠化疗型卵巢早衰的治疗效果并探究电针影响骨髓间充质干细胞的机制。方法:1.从大鼠胫、腓骨中分离BMSCs进行培养,并对其表面标记物表达水平以及成骨、成脂分化能力进行鉴定;2.腹腔注射环磷酰胺溶液制备化疗型大鼠卵巢早衰的动物模型;3.动物模型制备完成后,连续5d取大鼠阴道涂片,通过亚甲蓝染色观察大鼠动情周期变化来确定造模是否成功;4.动物分为正常组、POF组、干细胞组、联合治疗组,干细胞组和联合治疗组大鼠尾静脉注射2×10~6个BMSCs。联合治疗组进行连续7d的电针治疗。5.对移植后各组大鼠进行血清激素、卵巢组织切片及卵泡计数、BMSCs归巢及颗粒细胞凋亡进行检测。结果:1.BMSCs细胞形态为长梭形。流式细胞检测CD29、CD44、CD90、CD45的阳性表达率为95.24%,98.55%,99.73%,2.79%,并可在特定诱导条件下分化为脂肪细胞和骨细胞。2.经过环磷酰胺造模后,大鼠出现活动量减少、进食进水量减少、毛发光泽消失。阴道涂片亚甲蓝染色发现动情周期紊乱或延迟,证明造模成功。3.治疗结束后,两个治疗组的大鼠血清雌二醇含量明显升高,血清卵泡刺激素含量明显下降(P<0.05)。4.卵巢组织病理结果发现治疗后的生长阶段卵母细胞数量增多,颗粒细胞结构明显致密,数量增加。5.BMSCs归巢水平检测发现,联合治疗组归巢到卵巢的BMSCs明显多于干细胞组(P<0.01),趋化因子受体CXCR4蛋白表达水平升高(P<0.05)。6.环磷酰胺造模后卵巢组织颗粒细胞凋亡明显增加,经过治疗后的两组凋亡细胞数量明显减少,而联合治疗组的凋亡细胞数量则更少(P<0.05)。与干细胞组相比,联合治疗组大鼠卵巢Bcl-2蛋白表达增高(P<0.05),Bax蛋白表达降低(P<0.05)。结论:1.采用骨髓贴壁法,成功培养出BMSCs;2.采用腹腔注射环磷酰胺的方法可成功制备化疗型卵巢早衰大鼠模型;3.电针联合BMSCs治疗化疗型卵巢早衰可获得更好的疗效。
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