目的:新型冠状病毒（SARS-Co V-2）重组蛋白疫苗是一类预防2019新型冠状病毒肺炎的重要疫苗之一,SARS-Co V-2 S1蛋白和S蛋白作为致病性关键蛋白,在疫苗的研发设计中有重要作用。本研究通过体外构建SARS-Co V-2重组S1蛋白和S蛋白免疫动物,探讨SARS-Co V-2重组S1蛋白和S蛋白疫苗对SARS-Co V-2的免疫保护效果。方法:1.实验动物免疫45只BALB/c纯系健康雌性小鼠随机分9组分别为空白对照组、S1-Al（OH）3-0.1μg组、S1-Al（OH）3-1μg组、S1-Al（OH）3-5μg组、S1-Al（OH）3-10μg组、S-Al（OH）3-0.1μg组、S-Al（OH）3-1μg、S-Al（OH）3-5μg和S-Al（OH）3-10μg组,将SARS-Co V-2重组S1蛋白和S蛋白分别联合氢氧化铝佐剂以0.1μg、1μg、5μg、10μg/只不同剂量对各组小鼠进行免疫。免疫程序分别为0和14天两次免疫。2.小鼠脾细胞分离试验第二次免疫后的第17天对每组小鼠进行眼球采血和脾细胞分离。先进行小鼠眼球采血,收集的血液经离心得到血清,将血清低温储存以备后续用于酶联免疫吸附试验和假病毒中和试验。将采血后的小鼠处死,通过解剖、取脾、研磨、过滤、裂解、润洗、重悬、脾细胞计数和单个核细胞（PBMCs）稀释用于酶联免疫斑点试验。3.酶联免疫吸附试验通过酶联免疫吸附试验检测免疫小鼠血清中Ig G抗体效价,按照小鼠新型冠状病毒S1（Ig G）检测试剂盒和小鼠新型冠状病毒S（Ig G）检测试剂盒操作说明书检测各组免疫小鼠血清Ig G抗体滴度。4.假病毒中和试验通过假病毒中和试验检测免疫小鼠血清对SARS-CoV-2野生型株（WT）、英国株（B.1.1.7）、巴西株（P.1）、印度株（B.1.617.2）、Mu毒株（B.1.621）和南非株（501Y.V2-1）六种假病毒毒株中和活性效价。5.酶联免疫斑点试验将小鼠脾细胞分离试验得到的脾细胞进行酶联免疫斑点试验,通过酶联斑点图像分析系统进行斑点计数,根据各组斑点数的多少反应各组小鼠的细胞免疫水平。结果:1.45只BALB/c纯系健康雌性小鼠在饲养期间均健康,除去空白对照组,其他各组均按时按量接种对应疫苗。2.各组小鼠均完成眼球采血实验,每只全血采血量均不少于600μl。各组小鼠也均在无菌条件下完成脾细胞的分离试验。3.SARS-Co V-2重组S和S1蛋白都能诱导小鼠产生较强的Ig G抗体水平。SARS-Co V-2 S蛋白诱导Ig G抗体效价强于S1蛋白,并且高剂量（5μg、10μg）组S和S1蛋白疫苗诱导小鼠产生的Ig G抗体水平强于低剂量（0.1μg、1μg）组。4.免疫S1蛋白的小鼠血清对SARS-Co V-2野生型株、英国株、巴西株有明显的中和活性,免疫S蛋白的小鼠血清除了对SARS-Co V-2野生型株、英国株、巴西株有明显中和活性之外,对印度株也有明显的中和活性,两种蛋白免疫的小鼠血清均对野生型株中和效果最强。SARS-Co V-2 S蛋白诱导中和抗体效价强于S1蛋白。5.S蛋白免疫的小鼠脾细胞能够显著诱导出干扰素-γ（IFN-γ）和白介素-4（IL-4）的产生。SARS-Co V-2 S蛋白诱导细胞免疫反应强于S1蛋白。结论:SARS-Co V-2重组S1蛋白和S蛋白疫苗高剂量（5μg、10μg）组比低剂量（0.1μg、1μg）组诱导产生更强的保护性免疫应答。S蛋白诱导产生的Ig G抗体、中和抗体、细胞免疫水平均高于S1。因此SARS-Co V-2重组S蛋白疫苗能够诱导产生较强的保护性免疫应答。