【摘 要】
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紫锥菊[Echinacea purpurea（L.）Moench]属于菊科松果菊属,是一种原产于北美的草本植物,具有悠久的药用历史。然而目前关于紫锥菊的研究主要局限于单一提取物,如酚酸、黄酮、多糖等。本文以紫锥菊的开花部位为研究对象,结合化学和仪器分析方法,对紫锥菊多酚多糖共价物进行分离提取、纯化及结构表征。并分别采用体外抗氧化实验、巨噬细胞RAW 264.7模型和体外发酵实验研究其抗氧化活性、免
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紫锥菊[Echinacea purpurea（L.）Moench]属于菊科松果菊属,是一种原产于北美的草本植物,具有悠久的药用历史。然而目前关于紫锥菊的研究主要局限于单一提取物,如酚酸、黄酮、多糖等。本文以紫锥菊的开花部位为研究对象,结合化学和仪器分析方法,对紫锥菊多酚多糖共价物进行分离提取、纯化及结构表征。并分别采用体外抗氧化实验、巨噬细胞RAW 264.7模型和体外发酵实验研究其抗氧化活性、免疫活性以及酵解特性,得到以下结论:（1）采用碱提法从紫锥菊中获得了紫锥菊多酚多糖共价结合物（Echinacea polyphenol-polysaccharide conjugates,EP）,得率为2.10%。通过葡聚糖凝胶柱（Sephadex G-15）对粗提物进行了纯化,得到三个组分EP-1、EP-2和EP-3。其分子量分别为22.96k Da、16.23 k Da和10.41 k Da。（2）通过化学组分、高效液相色谱和红外光谱的测定,表明了共价物主要由酚类物质和多糖共价结合而成。EP-1、EP-2和EP-3中的单糖包括鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖五种,但是其摩尔比不同,分别为1:2.7:1.2:3.9:3.6、1:3.2:1:3.5:3.8和1.6:3.3:1:6.3:4.7。通过甲基化分析发现EP-1中糖苷键的主要连接方式是6-Glcp、2,5-Araf、T-Araf和6-Galp,EP-2中糖苷键的主要连接方式是3,4-Galp、6-Glcp和2,5-Araf,EP-3中糖苷键的主要连接方式是6-Glcp、T-Glcp和6-Galp。（3）采用体外化学抗氧化实验研究了EP的总抗氧化能力、DPPH·自由基清除能力、还原能力、·OH自由基清除能力和O2-·自由基清除能力,结果表明EP的抗氧化能力较强。经过比较发现EP-1、EP-2和EP-3的总抗氧化能力相近,没有显著性差异。（4）使用RAW 264.7巨噬细胞模型对EP的免疫活性进行了评估,并比较了各组分对细胞增殖、吞噬活性和免疫因子IL-6、IL-10和TNF-α释放量的影响。结果表明,在100μg/m L时,EP-2能够使巨噬细胞活化,并显著促进细胞免疫因子的释放。（5）采用猪结肠消化物的体外发酵实验研究了EP的酵解特性,结果发现,EP能被肠道微生物酵解利用,但其分子量降解速度较慢。发酵过程中,EP可以增加短链脂肪酸含量,提高肠道菌群的多样性并改善肠道菌群结构。本研究结果表明,从紫锥菊中分离得到的多酚多糖共价物具有较好的抗氧化性能和免疫活性,但其在肠道中的酵解速度较慢。紫锥菊大分子糖结合物可能有助于开发新的天然药物或膳食补充剂。
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