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坛紫菜是我国沿海地区广泛种植的经济型藻类,它味道鲜美,营养丰富,深受消费者喜爱,而坛紫菜多糖作为坛紫菜的重要营养成分,具有一系列优良的生物活性。为了深入研究坛紫菜多糖的生物活性以及拓展坛紫菜多糖的应用,本文对水提醇沉法提取的坛紫菜粗多糖(CPHP)进行分离和纯化,对各纯化组分(PHP1、PHP2和PHP3)的化学组成和结构进行表征,研究了坛紫菜多糖各组分的体外抗氧化活性。将PHP2与卵清蛋白复合并用于包埋白藜芦醇制备微胶囊(OPR),对OPR微胶囊进行了稳定性和活性进行了研究。本文主要研究结果如下:1、利用水提醇沉法提取了坛紫菜粗多糖CPHP,利用维素DE-52离子交换层析柱和葡聚糖Sephadex G-100对CPHP进行了分离和纯化,最终收集得到3种多糖组分PHP1、PHP2和PHP3。CPHP的提取率达以10.53%;PHP1、PHP2和PHP3的得率分别为:11.44%、16.39%和8.97%。2、CPHP、PHP1、PHP2和PHP3多糖组分的总糖含量分别为53.11%、64.53%、66.89%和65.12%,四种多糖组分均都有一定量的硫酸基和微量蛋白质的存在。通过GC-MS分析单糖组成和3,6-内醚半乳糖含量的测定,发现四种多糖组分主要由半乳糖和3,6-内醚半乳糖构成,几乎不含其它种类的单糖。四种多糖分子量经HPGPC分析测定分别为538、499、523和797 kDa。四种多糖红外光谱相似,说明分离纯化过程中对多糖构型未发生改变,核磁共振氢谱分析PHP1、PHP2和PHP3组分均含有6-硫酸基-α-L-半乳糖、3,6-内醚-α-L-半乳糖和β-D-半乳糖结构单元。3、体外自由基清除实验结果表明,CPHP、PHP1、PHP2和PHP3对DPPH自由基清除率的IC50值分别为5.68、5.99、5.34和4.49 mg/mL;对超氧阴离子自由基清除率的IC50值分别为5.22、5.48、4.82和4.24 mg/mL;对羟自由基清除率的IC50值分别为5.44、6.15、5.22和4.84 mg/mL;铁还原力大小顺序与它们对三种自由基的清除活性一致:PHP3>PHP2>CPHP>PHP1。4、抗氧化应激实验结果表明各多糖样品具有显著的保护细胞抵抗氧化应激活性。在CPHP、PHP1、PHP2和PHP3(400μg/mL)的干预下,被H2O2刺激的巨噬细胞RAW264.7中MDA含量分别降低了0.72、0.63、0.96和1.07 nmol/mg prot;SOD酶活力上升了3.97、3.13、6.55和6.7 U/mg prot;CAT酶活力上升了1.32、0.95、1.41和1.51 U/mg prot;GSH-Px酶活力上升8.12、6.18、8.71和9.71 U/mg prot;ROS水平降低了124.05%、112.94%、123.94%和142.02%。5、采用复凝聚法制备了卵清蛋白(OVA)-PHP2复合粒子,OVA-PHP2复合粒子分散液ζ电位绝对值较大,粒径较小且较均一,证明OVA-PHP2稳定性较好,具有成为微胶囊外壳材料的潜力。制备了用OVA-PHP2复合粒子包埋白藜芦醇的OPR微胶囊,并用响应面法优化了OPR微胶囊的制备工艺。在优化条件下制备的OPR微胶囊对白藜芦醇的包埋率达95.38%,载药率为2.89%,平均粒径为256.83 nm(pH=7),PDI值为0.4123。通过对包埋白藜芦醇的微胶囊的pH稳定性、紫外光照射稳定性和贮藏稳定性分析可知,蛋白质-多糖体系(OVA-PHP2)无论是分散液稳定性还是对白藜芦醇的保护均优于单一的OVA包埋体系。由体外消化模拟实验发现,与OVA包埋白藜芦醇的微胶囊(OR)相比,OPR在胃中对白藜芦醇有更显著的缓释作用,而在肠道中释放更快,肠液中释放的白藜芦醇比胃液中高20.07%。6、抗氧化试验结果表明OPR和OR对DPPH自由基清除活性均高于未被包埋的白藜芦醇。未被包埋的白藜芦醇、OR和OPR清除DPPH自由基的IC50值分别为35.77、29.88和24.99μg/mL。抗肿瘤活性研究表明,OPR(692.04μg/mL,含白藜芦醇20μg/mL)对Hela细胞作用24 h和48 h后的抑制率分别为30.59%和36.69%,IC50值分别为1114.87μg/mL和927.49μg/mL;同样浓度的OPR对HepG2细胞作用24 h和48 h后的抑制率分别为29.76%和39.63%,IC50值分别为1145.59和842.06μg/mL。